何清彦++皮胜玲++谢嘉驰++夏伯候++李亚梅++林丽美
[摘要] 意图 查询当归等10种药食两用中药材中有机氯六六六、滴滴涕和五氯硝基苯的残留量，为该类药食两用药材的安全性点评供给试验数据，为其规范的进一步完善供给参阅。 办法 从商场搜集该类药材30批次，选用GC-ECD检测办法对其进行9种有机氯农药残留检测。 成果 所树立的含测办法均匀回收率为90.97%～103.56%，RSD值0.4%～2.7%。所测定的当归、党参等药材中均含有不同程度的有机氯农药残留。 定论 药食两用药材的农药残留定量需严厉操控。
[关键词] 药食两用中药材；有机氯残留；气相色谱-电子捕获检测器
[中图分类号] R282.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）04（a）-0004-05
跟着中药工业的敏捷开展，野生药材资源不断削减，现不少药材已到濒危绝地，因而人工培养成为处理中药资源缺少的首要办法[1-2]。但是，因为生态环境的恶化，病虫的损害，化肥、农药的不合理运用，硫磺熏蒸等不规范出产、加工办法，中药材质量低质，农药残留、重金属、二氧化硫、硝酸盐等有毒有害物质超支，严重损害患者用药安全，中药材的安全性和质量成为全社会重视焦点和中药材出产加工亟待处理的问题[3-6]。
我国在20世纪70年代末已宣告制止运用滴滴涕（DDT）、六六六（BHC）等有机氯农药[7-8]，因而类农药化学性质安稳，脂溶性大，残留期长，易在脂肪组织中积蓄，形成缓慢中毒，危及人体健康。但是，现在有机氯农药残留污染仍是形成中药材质量下降的首要原因之一，且已成为限制我国中药材走向国际商场的重要妨碍[9-16]。鉴于药食两用药材是一类运用频率最高、用量大、理论上安全确保最好的中药材，更是人们日常日子食疗保健的质料，笔者搜集了商场上10种药食两用药材，包含当归、党参、天麻、黄芪、甘草、玉竹、百合、金银花、山银花、菊花，共30批次，选用GC-ECD法测定其间9种有机氯农药残留的含量，查询其间有机氯BHC、DDT和五氯硝基苯（PCNB）的残留量，为该类药食两用药材的安全性点评供给试验数据，且为其规范的进一步完善供给参阅。
1 仪器与试药
1.1 仪器
GC-2010 Plus气相色谱仪，包含63Ni电子捕获检测器，自动进样器，LCsolution工作站（日本岛津）；KQ3200B型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；RE-52AA旋转蒸腾仪（上海亚荣生化仪器厂）；800B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；氮吹仪；刻度浓缩瓶。
1.2 试药
BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB农药规范品均购自农业部环境保护科研监测所（浓度均为100 μg/ml，纯度>97.7%），当归、党参、天麻、黄芪、甘草、玉竹、百合、金银花、山银花、菊花各3批次药材均收集于亳州、廉桥等药材商场，别离经湖南中医药大学中药判定教研室刘塔斯教授判定为正品。试剂：丙酮、石油醚、二氯甲烷为农残级，氯化钠、无水硫酸钠等试剂均为剖析纯，水为超纯水。
2 办法与成果
2.1 色谱条件
DB-1色谱柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；进样口：230℃；检测器：300℃；选用程序升温：初温100℃，以10℃/min升至220℃，再以8℃/min升至250℃坚持10 min；分流进样，分流比：50∶1；进样量1 μl。载气：高纯氮（纯度>99.999%），混合对照品出峰次序为α-BHC、PCNB、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC、p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT，所得空白溶剂和混合对照品色谱图见图1、图2。
时刻（min）
图1 空白溶剂色谱图
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液的制备 别离取上述各对照品液（100 μg/ml）各0.5 ml至10 ml量瓶中，参加石油醚（60～90℃）稀释至刻度，即得浓度为5 μg/ml的混合对照品储藏液。取混合对照品储藏液0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 ml至5 ml量瓶中，别离加石油醚（60～90℃）稀释至刻度，即得0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 μg/ml的溶液。
2.2.2 样品溶液的制备 取供试品于60℃枯燥4 h，粉碎成细粉，过二号筛，取约2 g，置100 ml锥形瓶中，加水20 ml浸泡过夜，加丙酮40 ml，称定分量，超声处理30 min，放冷，用丙酮补足减失的分量，再加氯化钠6 g，加二氯甲烷30 ml，称定分量，超声处理15 min，放冷，用二氯甲烷补足减失的分量，静置使分层。将有机相敏捷移入装有无水硫酸钠的100 ml锥形瓶中，放置4 h。取35 ml，于40℃水浴上减压浓缩至近干，加少数石油醚（60～90℃）如前重复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（60～90℃）溶解并转移至10 ml具塞刻度离心管中，加石油醚（60～90℃）稀释至5 ml，当心参加硫酸1 ml，振摇1 min，3000 r/min离心10 min，取上清液2 ml，置具刻度的浓缩瓶中，衔接旋转蒸腾器，40℃将溶液浓缩至适量，稀释至1 ml，即得。
2.3 线性关系查询
精细量取上述0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 μg/ml各农药混合对照品溶液，依“2.1”色谱条件剖析，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得到相应回归方程（表1）。
2.4 检出限
制造一系列低浓度溶液进样，以信噪比（S/N=3）测得BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB检出限别离为0.2、0.2、0.2、0.4、0.2、0.2、0.6、0.6、0.4 ng/g。
2.5 重复性试验
取当归（甘肃1）样品5份，按“2.2.2”项下操作制备待测液，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDD、o，p′-DDT）峰面积值的RSD别离为1.7%、1.0%、2.0%、1.5%，标明办法重复性杰出。
2.6 精细度试验
精细汲取1.0 μg/ml混合对照液1 μl，接连进样5次，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB峰面积值的RSD别离为1.9%、0.7%、0.4%、1.2%、0.3%、0.4%、0.6%、1.0%、0.8%，标明仪器精细度杰出。
2.7 安稳性试验
精细汲取1.0 μg/ml混合对照液1 μl，接连在1、8、16、32、48 h进样，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB峰面积值的RSD别离为1.2%、1.0%、0.5%、1.0%、1.1%、1.5%、1.9%、1.0%、0.6%，标明样品溶液在48 h内安稳。
2.8 回收率试验
取当归样品9份，每份约2.0 g，精细称定，分3个水平增加混和对照品溶液，每水平重复3次，混匀，天然晒干，按“2.1”项下操作测定，所得成果扣除样品中各农药残留量，核算加样回收率，成果见表2。
2.9 样品测定
精确称取各药材样品，按“2.2.2”项下操作制备待测液，按“2.1”色谱条件测定，成果见表3。
3 评论
3.1 色谱及试验条件优化
本试验别离选用SE-54、HP-1、Rtx-1701、DB-1等色谱柱进行比较，最终选用Rtx-1701对各BHC、DDT异构体别离度适中，峰型较好，且最低检出限值相对最低，满意本次有机氯残留量痕量检测要求。本试验有机试剂丙酮、石油醚、二氯甲烷均选用农残级，如用剖析纯易对测定发生搅扰，尤其是丙酮、石油醚。有机相减压浓缩时，水浴温度不能高于40℃，且减压浓缩有必要至近干，避免待测成分丢失。
3.2 检测成果
试验成果显现，30批药食两用药材均不同程度地被检出有机氯残留量，尤以当归、党参等根及根茎类药材总含量相对较高，花类药材相对偏低，在2015年版《我国药典》四部中，规则了药材、饮片及制剂中有机氯、有机磷以及拟除虫菊酯类共3类37种农药残留的检测办法，但《我国药典》2015年版一部正文中仅对甘草、黄芪、人参、西洋参、人参茎叶总皂苷、人参总皂苷中有机氯残留量做了定量规则。参阅黄芪、甘草药典有机氯残留定量规范[17-19]，总BHC：0.2 mg/kg；总DDT：0.2 mg/kg；PCNB：0.1 mg/kg，本次试验成果均没有超出极限规模，关于当归、党参、金银花等药食两用药材，因其运用的直接性、广泛性和多样化，希望能严厉操控其农药残留，赶快树立农药残留极限规范。
3.3小结及主张
跟着我国健康工业开展的火急需求，中药材尤其是药食两用药材必将成为人们日常疾病防备及保健摄生的重要原材料，其质量安全性直接关乎人们日子质量和生命健康，跟着国际经济一体化开展进程的加速，中药必定走向国际商场参加竞赛，其安全性问题成为重视焦点，一起亦是中医中药全球化开展瓶颈，其农药残留问题有必要得到有用操控才足以进步中药材的国际诺言和层次，才能使中医药工作愈加健康地向前开展。
针对药食两用药材的农药残留问题，药材出产施行规范化质量管理（GAP）有必要严厉树立配套的规范、法规，加大监督、处分力度，对药材出产基地的挑选规范、运用农药的品种及运用农药的人员和设备状况、中药加工和仓储的条件、中药中农药残留量的检测办法和定量规则以及监督办法等树立翔实的法规性文件，并采纳处分办法等各种手法确保GAP得以贯彻施行，确保“绿色药材”的出产。关于已污染的土壤怎么选用适宜的办法下降其农药残留量[20-22]，如以微生物技能投菌法生物修正降解有机氯农药等，从土壤源头来下降和消除栽培中药材的农药残留污染问题，改进栽培生态环境。
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（收稿日期：2016-01-10 本文修改：王红双）
