王小琼 钱正康 惠李 朱程 吴兢琴 尹晓莉 刘芹
[摘要] 意图 评论白介素-18（interleukin-18，IL-18）基因rs1946518多态性是否是首发精力分裂症的易感基因位点，并进一步检测其是否影响精力分裂症患者的临床症状。 办法 招募首发精力分裂症患者348例和健康對照者419名，临床症状选用阳性与阴性症状量表（postive and negative syndrome scale， PANSS）进行评价，选用TaqMan SNP办法对IL-18基因rs1946518多态性进行基因分型为GG、GT、TT。拟定CRF表，搜集一般人口学和临床数据。成果 IL-18基因rs1946518位点基因型和等位基因的频率散布在首发精力分裂症患者与健康对照组间无明显性差异（χ2=1.60，df=2，P=0.45；χ2=0.73，df=1，P=0.39）。首发精力分裂症组按IL-18基因rs1946518位点的基因型进行分组剖析：阳性症状（F=5.57，P=0.004）和临床症状总分（F=4.57，P=0.01）在组间呈现明显差异。 定论 IL-18基因rs1946518位点可能不参加首发精力分裂症的发病，但它影响首发精力分裂症患者的临床精力症状，特别阳性症状。
[关键词] 首发精力分裂症；IL-18基因；临床症状；rs1946518
[中图分类号] R749.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）10-0001-04
Correlation of IL-18 gene polymorphism with clinical psychological symptoms in the patients with first-episode schizophrenia
WANG Xiaoqiong1 QIAN Zhengkang2 HUI Li2 ZHU Cheng1 WU Jingqin2 YIN Xiaoli1 LIU Qin2
1.Clinical Laboratory， Affiliated Kangning Hospital of Wenzhou Medical University， Wenzhou 325000， China； 2.Department of Psychiatry， Affiliated Guangji Hospital， Suzhou University， Suzhou 215137， China
[Abstract] Objective To investigate whether rs1946518 polymorphism of interleukin-18 （IL-18） gene is a predisposing gene locus for first-episode schizophrenia， and to further determine whether it affects the clinical symptoms in the patients with schizophrenia. Methods 348 patients with first-episode schizophrenia and 419 healthy controls were recruited. Clinical symptoms were assessed using Positive and Negative Syndrome Scale（PANSS）. The TaqMan SNP method was used to carry out genetic typing of rs1946518 polymorphism of IL-18 gene as follows： GG， GT， TT. CRF table was established， and general demographic and clinical data were collected. Results There was no significant difference in genotype and allele frequencies of rs1946518 locus in IL-18 gene between the patients with first episode schizophrenia and healthy controls（χ2=1.60， df=2， P=0.45； χ2=0.73， df=1， P=0.39）. The genotype in the first schizophrenia group according to rs1946518 locus in IL-18 gene was analyzed in groups： total scores of positive symptoms（F=5.57， P=0.004） and clinical symptoms（F=4.57， P=0.01） were significantly different among groups. Conclusion rs1946518 locus in IL-18 gene may not be involved in the pathogenesis of first-episode schizophrenia， but it affects the clinical psychiatric symptoms in the patients with first-episode schizophrenia， especially positive symptoms.
[Key words] First-episode schizophrenia； IL-18 gene； Clinical symptoms； rs1946518
现在学者普遍认为免疫系统反常是精力分裂症发病的重要机制之一。已有研讨成果显现精力分裂症发病与血液或脑脊液的细胞因子水平反常有相关性，如白介素-2（interleukin-2，IL-2）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）和白介素-18（interleukin-18，IL-18）[1]。IL-18广泛散布于机体中，首要效果为促进γ-干扰素排泄，增强NK细胞活性，促进Th1细胞的分解，参加Th1的生物反响。IL-18在炎症因子的介导下调控IL-1的水平[2，3]，并促进抗炎免疫因子（IL-2、IL-4）的发生[4]。IL-18基因坐落人类染色体的11q22.2-q22.3区域，rs1946518位点在该基因上游调控区域的转录因子结合部位[5]，直接影响IL-18基因的转录和表达[6]。IL-18基因上rs1946518位点是一个功能性位点，可能参加精力分裂症的发病和临床精力症状。因而，本研讨挑选首发精力分裂症患者作为研讨目标，进一步验证IL-18基因位点rs1946518多态性在首发精力分裂症发病和临床症状中的效果。现报导如下。
1 目标与办法
1.1 研讨目标
温州医科大学隶属康宁医院道德委员会同意该项目计划和知情同意书，项目执行时间2015年9月～2017年11月。本院检驗科工作人员帮忙搜集348例首发精力分裂症受试者（男177例，女171例）的血液样本，平均年纪（27.3±9.0）岁，患者应契合以下入组规范：①精力分裂症的确诊规范选用国际疾病分类规范第10版（ICD-10）；②年纪16～33岁；③承受5年教育水平以上；④有才能承受临床症状评价；⑤在了解本院计划后，自愿参加该项目，受试者签署该项目知情同意书。扫除规范：①中枢神经疾病；②无精力分裂症；③躯体疾病患者，如糖尿病、感染和高血压等；④哺乳期和妊娠期妇女。
419名健康对照者（男280例，女139例）样本来自温州医科大学隶属康宁医院健康体检中心，平均年纪（28.1±8.0）岁，受试者契合以下入组规范：①现在或既往无任何精力疾病和宗族史；无物质依靠史；无中枢神经系统疾病；②身体健康；③自愿参加本研讨。扫除规范：①精力分裂症者；②中枢神经系统疾病者；③躯体疾病者，如糖尿病、感染和高血压等；④哺乳期和妊娠期妇女；⑤在了解本院计划后，非自愿参加该项目，并签署受试者知情同意书。两组研讨目标材料之间具有可比性。
1.2 办法
1.2.1 搜集临床材料 选用自己编制的病例记载表（case report form，CRF）搜集受试者的临床和社会人口学材料，包含性别、年纪、教育水平、宗族疾病史等。选用阳性和阴性症状量表（postive and negative syndrome scale，PANSS）评价首发精力分裂症患者的临床精力症状[7]。
1.2.2 DNA提取 清晨收集受试者的空腹静脉血5 mL于促凝管中，别离血浆，剩下血液样本选用美国Promega公司出产的DNA试剂盒并按说明书过程提取DNA，Nanodrop2000检测其DNA浓度，标化DNA工作液浓度为50 ng/μL，100 μL/管贮存于-86℃冰箱备用。
1.2.3 IL-18基因rs1946518位点的检测 使用美国Thermo公司出产的QuantStudioTM Dx实时荧光定量PCR仪，订货Thermo公司IL-18基因rs1946518位点的引物和荧光探针（编号为：C_2898460_10，货号：4351379），选用TaqMan SNP的基因分型检测技能对rs1946518多态性展开基因分型，成果为GG、GT和TT。
1.3 计算学办法
首发精力分裂症组和健康对照组临床和人口学材料连续性变量选用SPSS17.0计算学软件的方差剖析，计数材料选用χ2查验。SHEsis在线遗传计算软件剖析健康对照组和首发精力分裂症组的IL-18基因rs1946518多态性的基因型是否契合哈代-温伯格（Hardy-Weinberg，H-W）遗传平衡度，并进一步剖析首发精力分裂症组和健康对照组该基因位点的等位基因和基因型散布频率的差异。按该基因位点的基因型分组，选用方差剖析对首发精力分裂症组的临床精力症状进行剖析，并调整相关的协变量，其查验水准P<0.05。
2 成果
2.1 IL-18基因rs1946518多态性在首发精力分裂症和健康对照组中的H-W遗传平衡
选用在线遗传计算SHEsis软件剖析成果显现：首发精力分裂症患者与健康对照组中IL-18基因rs1946518位点基因型的频率散布契合H-W遗传平衡（χ2=0.67，P>0.05；χ2=0.23，P>0.05）。
2.2 IL-18基因rs1946518多态性与首发精力分裂症
选用在线遗传计算SHEsis软件剖析标明IL-18基因rs1946518位点的等位基因和基因型频率散布在健康对照与首发精力分裂症组间无明显性差异（χ2=1.60，df=2，P=0.45；χ2=0.73，df=1，P=0.39），见表1。咱们进一步选用SPSS计算学软件操控受试者的性别和年纪后，发现两组之间基因型和等位基因频率散布仍无差异（P<0.05）。
2.3 IL-18基因rs1946518多态性与首发精力分裂症患者的临床精力症状
rs1946518多态性基因型与首发精力分裂症的临床症状之间的联系见表2。成果显现rs1946518多态性基因型组间患者组PANSS阳性症状分值（F=5.57，P=0.004）和临床精力症状总分值（F=4.57，P=0.01），差异有计算学含义。在操控年纪、性别和教育后，首发精力分裂症中该基因型分组间PANSS阳性症状分和临床症状总分仍有明显性差异（P<0.01）。
3 评论
在我国汉族人群中，IL-18基因的rs1946518位点不是首发精力分裂症的易感基因位点，提示该基因位点的改变不参加我国汉族首发精力分裂的发病机制。Liu J等[8]研讨人员也发现我国汉族精力分裂症组和健康对照组之间IL-18基因发动子区域的rs1946518位点的等位基因和基因型没有明显性差异。Zhang XY等[9]研讨成果标明，首发精力分裂症患者的血清IL-18水平与健康对照之间没有差异。但是，有研讨标明血清或脑脊液中IL-18水平与精力分裂症发病有明显相关性[1]。最近国内有研讨也报导缓慢患者的血清IL-18水平明显高于健康对照人群[10，11]。国外研讨[12-15]也发现健康对照组血清IL-18水平明显低于精力分裂症患者。有研讨发现其他精力疾病患者的IL-18水平也存在反常[16，17]。有研讨发现，IL-18基因上碱基位点的改变在精力分裂症发病中发挥效果，影响患者的临床症状，提示该基因是精力分裂症的易感基因[18-20]。可能是因为种族、性别、病程、环境和单基因位点研讨等要素的差异所造成的。因而，未来咱们有必要展开IL-18基因的多位点、位点-位点交互效果、该基因和环境交互效果对首发精力分裂症发病影响的研讨。
此外，IL-18基因rs1946518位点与首发患者的临床症状具有相关性，特别阳性精力症状。该基因位点影响首发精力分裂症的临床精力症状的可能机制：该基因位点的碱基改变可能參与了首发精力分裂症患者多巴胺等神经递质反常和传递，进而影响其临床精力症状。有研讨发现坐落IL-18基因发动子区的rs1946518位点改变参加了我国汉族精力分裂症的临床表型反常，进一步研讨还发现该基因其他位点的改变影响精力分裂症患者的阳性精力症状[4]。从精力分裂症患者血清IL-18水平展开研讨，发现血清IL-18水平与我国汉族缓慢精力分裂症的临床症状具有正相关性，进一步研讨显现血清IL-18水平也影响首发患者的其他临床表型[5，6]。上述成果均提示IL-18水平可能影响首发精力分裂症的临床精力症状。但是，咱们未来应进一步展开IL-18基因其他功能性位点、基因表达和蛋白水平改变与首发精力分裂症的临床症状相关性研讨。
该研讨也有不足之处：①仅检测IL-18基因上一个功能性位点，不能代表IL-18基因悉数突变位点。因而，未来咱们应该展开该基因其它功能性位点的查看，选用多位点联合剖析及基因位点和环境要素联合剖析的办法评论该基因在首发精力分裂症发病和临床精力症状中的效果；②种族不同，IL-18基因rs1946518多态性的等位基因突变频率也不同。因而，未来咱们应该在不同区域展开不同种族的研讨，进一步验证咱们的成果；③精力分裂症确诊具有异质性，本研讨患者由本院精力科医师供给，不同精力科医师对ICD-10精力分裂症的确诊了解程度不同。因而，这可能导致精力分裂症的确诊上存在异质性；④本研讨受试者招募于本院的门诊和住院患者，可能有其它稠浊要素影响咱们的成果。
总归，IL-18基因 rs1946518位点并不参加首发精力分裂症的易感基因位点，但该基因的位点却涉及到首发患者的临床精力症状，特别阳性精力症状。本研讨成果仅仅是开始成果，后期咱们应在不同种族中选用独立的大样本首发精力分裂症，从IL-18基因其他功能性位点、基因表达和蛋白水平方面进一步验证咱们的成果。
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（收稿日期：2017-12-14）
