李克红 赖俊玲 张苑平 张英杰 温达雄
[摘要]意图 评论高危型乳头瘤病毒（HPV）与P16、Ki-67检测在宫颈癌前期筛查中的价值。办法 挑选河源市人民医院2015年1月～2017年12月运用免疫安排化学办法检测30例宫颈正常安排、75例宫颈上皮内瘤变（CIN）中P16和Ki-67的表达，选用PCR法检测高危型HPV感染状况。成果 宫颈上皮内低度瘤变（CINⅠ）中，P16阳性率为77.80%，Ki-67阳性率为65.80%，高于宫颈正常安排0.00%，差异有统计学含义（P<0.05）；宫颈上皮内高度瘤变（CINⅡ～Ⅲ）中，P16和Ki-67阳性率为100.00%、94.70%，高于CINⅠ，差异有统计学含义（P<0.05）。高危型HPV在宫颈正常安排、CINⅠ和CINⅡ～Ⅲ病变组感染者分别为6.70%、66.70%、84.60%和90.30%，宫颈癌前病变安排显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）。定论 高危型HPV感染及P16、Ki-67与宫颈癌前病变发作开展相关，联合运用可作为CIN分级确诊的辅佐办法，有较好的运用价值。
[关键词]宫颈癌前病变；P16；Ki-67；高危型HPV；免疫安排化学
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2018）5（b）-0060-03
The value of high-risk HPV，P16 and Ki-67 detection in early screening of cervical cancer
LI Ke-hong1 LAI Jun-ling1 ZHANG Yuan-ping1 ZHANG Ying-jie1 WEN Da-xiong2
1.Department of Gynecology and Obstetrics，People′s Hospital of Heyuan City，Guangdong Province，Heyuan 517000，China；2.Department of Pathology，People′s Hospital of Heyuan City，Guangdong Province，Heyuan 517000，China
[Abstract]Objective To explore the value of high-risk HPV，P16 and Ki-67 detection in early screening of cervical cancer.Methods From January 2015 to December 2017，30 cases of normal cervical tissue and the expression of P16 and Ki-67 in 75 cases of cervical intraepithelial neoplasia （CIN） were detected by immunohistochemistry in our hospital.The high-risk HPV infection was detected by polymerase chain reaction （PCR）.Results The positivity rates of P16 （77.80%） and Ki-67（65.80%） and In the CIN Ⅰ，higher than those in normal cervical tissue accounting for 0.00%.The differences were statistically significant （P<0.05）.The positivity rates of P16 （100.0%） and Ki-67 （94.70%） in CINⅡ-Ⅲ was higher than those of CINⅠ （P<0.05）.High-risk HPV infection rates in normal cervical tissues，CINⅠ，and CIN Ⅱ-Ⅲ was 6.70%，66.70%，84.60% and 90.30% respectively，and the infection in the precancerous lesions the uterine cervix was significantly higher than that in the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion High-risk HPV infection，P16，and Ki-67 are associated with the occurrence and development of precancerous lesions of the uterine cervix.Use in combination can be considered as an auxiliary method for the diagnosis of CIN grading and has a good application value.
[Key words]Cervical precancerous lesion；P16；Ki-67；High-risk HPV；Immunohistochemistry
流行病學材料显现，全球的宫颈癌的发病率和死亡率处于较高水平，给患者家庭和社会带来沉重的经济压力和精神负担[1-2]。研讨证明，高危型人乳头瘤病毒（HPV）继续感染与宫颈癌有必定的相关性[3]，其病毒载量和阳性率越高，宫颈癌发作的时机越大[4]。宫颈癌前期确诊的关键是寻觅前期筛查与猜测宫颈癌前病变的有用办法。宫颈前期滋润癌大多无症状、通常在体检中发现。P16是分子生物事情中一种重要的抑癌基因，其在宫颈中过度表达与宫颈癌前病变联系亲近；而Ki-67可作为评价肿瘤医治及预后的分子靶标。本研讨经过免疫组化技能检测P16与Ki-67在宫颈癌前病变的表达，评论其在宫颈癌前病变的效果，并检测高危HPV感染，期望为宫颈癌前病变与宫颈癌的前期确诊和医治供给新的思路。
1材料与办法
1.1一般材料
一切病例均来自河源市人民医院2015年1月～2017年12月手术标本，共75例。按病理成果分类，低度上皮内瘤变（CINⅠ）18例，高度上皮内瘤变（CINⅡ和CINⅢ）57例。选30例宫颈正常安排作对照组。
1.2办法
用免疫组化办法检测30例宫颈正常安排，18例宫颈低度上皮內瘤变（CINⅠ），57例高度上皮内瘤变（CINⅡ和CINⅢ），并用聚合酶链反应（PCR）法检测高危型HPV-DNA的类型，可检测出13种HPV高危亚型。运用第二代杂交捕获技能（美国Digene公司）进行HPV-DNA检测，标本的荧光度值（RLU）与阳性定标的阈值（CO）的比值（RLU/CO）标明，RLU/CO值≥1.0 pg/ml则为高危HPV-DNA阳性。
1.3成果判别
根据安必平公司产品阐明和相关文献，p53阳性表达为胞核上色，无棕黄色颗粒者为（-），如显现棕黄色颗粒，则用（+）标明，如为棕黄色粗颗粒，则用（++）标明，如显现棕褐色粗颗粒，则标明为（+++）。
1.4统计学办法
运用SPSS 21.0软件对数据进行统计分析，计量材料以均数±标准差（x±s）标明，选用t查验；计数材料以率标明，选用χ2查验，选用Perason相关性检测核算相关性，以P<0.05为差异有统计学含义。
2成果
2.1 P16和Ki-67蛋白在宫颈活检安排中的检测成果
P16和Ki-67蛋白在宫颈活检安排中的检测成果如下（表1）：P16蛋白在宫颈CINⅠ级和CINⅡ～Ⅲ级的阳性表达率分别为77.80%、100.00%，宫颈等级越高，其表达越强，不同组别间表达差异有明显性（P<0.01）。Ki-67蛋白表达也呈递加趋势（P<0.01），表达强度也跟着CIN等级添加而增强，蛋白阳性表达率均高于对照组。
2.2高危HPV感染在宫颈安排中的表达
高危HPV感染在宫颈癌前病变安排中的阳性表达率为66.5%，而高危型HPV16/18的阳性表达率则为54.3%，且宫颈病变等级越高，其表达越强。成果显现，CINⅠ、CINⅡ及CINⅢ患者的高危HPV-DNA阳性率分别为66.70%，84.60%、90.30%，各组不同有统计学含义与宫颈病变程度成正相关（r=0.887，P<0.05）（表2）。
2.3宫颈病变安排中高危HPV感染与P16、Ki-67蛋白的联系
高危型HPV感染跟着P16和Ki-67蛋白表达增高，高危HPV感染也相应增高，且以HPV16为主，差异有统计学含义（P<0.05）（表3）。
3评论
宫颈癌是常见的恶性肿瘤，发达国家研讨显现，宫颈癌的发病率和病死率显着下降，但我国为开展我国家，宫颈癌还面对许多应战，且近来患者有年轻化的趋势，尽早发现宫颈前期病变，并采纳及时的医治是进步患者日子质量的重要办法[5]。HPV具有双股DNA链，可引起黏膜的鳞状上皮反常增殖[6-7]。现在发起精准医学，经过愈加准确的CIN分级与宫颈癌前病变的前期确诊，期望可下降宫颈癌的发作率。本研讨成果显现，高危HPV感染在宫颈病变安排中的感染率为66.5%，跟着CIN等级的升高，HPV-DNA相对含量也随之表达增强，提示宫颈癌及癌前病变的发作开展与高危型HPV感染有亲近的联系。
本研讨成果显现，宫颈上皮内低度瘤变（CINⅠ）中，P16阳性率为77.8%，Ki-67阳性率为65.8%，高于宫颈正常安排，差异有统计学含义（P<0.05）；宫颈上皮内高度瘤变（CINⅡ～Ⅲ）中，P16和Ki-67阳性率为100.00%、94.70%，高于CINⅠ，差异有统计学含义（P<0.05）。高危型HPV在宫颈正常安排、CINⅠ和C1NⅡ～Ⅲ病变组感染者分别为6.70%、66.70%，84.60%和90.30%，宫颈癌前病变安排显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）。因而，高危型HPV感染及P16、Ki-67与宫颈癌前病变发作开展相关，联合运用可作为CIN分级确诊的辅佐办法。
研讨标明，P16基因是近来发现的又一重要的抑癌蛋白，与人类肿瘤联系亲近，可作为有用的确诊标志物而区分出宫颈正常安排和上皮内瘤变安排。本研讨成果显现，P16蛋白跟着CIN等级升高，其表达强度亦相应添加，且表现出显着的分层现象，这与COX等[8]的定论相似。Ki-67是一种细胞增殖核抗原，在细胞周期的G1、S、G2和M期表达，在停止期为阴性[9-11]。对肿瘤的分期、搬运及预后判别等有必定价值[12-13]。本研讨成果显现，Ki-67基因在对照组中不表达，在高等级宫颈上皮内瘤变安排中的表达明显高于低等级宫颈上皮内病变安排，有望成为评价预后的一个目标[14-15]。
综上所述，高危型HPV继续感染是诱发宫颈癌前病变的重要原因，高危HPV感染和P16、Ki-67的一起表达在宫颈癌前病变中有重要的效果。联合检测P16和Ki-67的表达防止过度医治，简便易行，可为临床医治供给愈加清晰的分子病理确诊根据，可有用进步宫颈前期病变的检出率，下降误诊及漏诊率。
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（收稿日期：2018-01-24 本文修改：崔建中）
