陈丽丽+++张忠山
[摘要] 意图 比较不同产地枸杞多糖的含量。办法 选用热水浸提法别离提取宁夏、浙江和四川产枸杞中的多糖成分，苯酚-硫酸法测定枸杞多糖含量。成果 浙江产枸杞多糖含量0.830%，宁夏产枸杞多糖含量0.769%，四川产枸杞多糖含量0.590%。 定论 不同产地枸杞多糖含量不同，可能与环境、采摘时刻及加工进程等有关。
[关键词] 枸杞多糖；不同产地；热水浸提法；苯酚-硫酸法
[中图分类号] R917 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）26-0071-03
枸杞（Lycium chinense Mill）是双子叶植物纲茄目枸杞属植物，药用部位为其老练果实枸杞子。抗旱才能很强，其浆果枸杞子在《神农本草经》中引为上品，是我国传统贵重中药材。枸杞作为药食同源类植物，具有补肾养肝、清热凉血及益精明目等成效[1]。它既含有碳水化合物、蛋白质、脂肪、胡萝卜素、核黄素、钙、磷、铁、锌，还含有多种维生素及玉蜀黍黄素，因而一向遭到中外医学与食疗专家的高度重视。枸杞主产宁夏、河北、浙江、四川等省。枸杞多糖是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖，经研讨标明，枸杞多糖是枸杞子调理免疫、操控肿瘤成长和细胞骤变、推迟变老等的首要活性成分，可改进老年人易疲惫、食欲不振和视力含糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗变老等效果[2，3]，枸杞多糖对人体免疫功用低下所造成的的各种疾病有明显的效果，已成为保健食物的一种重要功用性添加剂，而且显现出杰出的运用远景。但有关不同产地枸杞多糖含量比较方面的研讨不多。本试验选取具有地域代表性的宁夏枸杞、浙江枸杞和四川枸杞，选用热水浸提法别离对枸杞多糖进行提取，并选用苯酚-硫酸法对枸杞多糖的含量进行测定。比较三种不同产地的枸杞中多糖含量的差异，为进一步开发枸杞资源及评论其药用价值奠定根底。
1 仪器与试药
1.1仪器
DK-S22型电热恒温水浴锅（上海精宏试验设备有限公司）；旋转蒸发器（上海申胜生物技能有限公司）；SC-101型鼓风电热恒温枯燥箱（浙江省嘉兴市新滕电器厂制作）；BP-Ⅱ型药物天平（上海医用激光仪器厂）；Spectrumlab 22PC可见分光光度计（上海楞光技能有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。
1.2试剂
无水葡萄糖（我国药品生物制品检定所）；硫酸（天津化学试剂有限公司）；无水乙醇（天津化学试剂有限公司）；枸杞（宁夏、浙江和四川）经浙江中医药大学资源与判定教研室陈孔荣教师判定为枸杞Lycium chinense Mill。
2 办法与成果
2.1溶液的制备
2.1.1供试品溶液的制备[4-6] 别离取不同产地的阴干的枸杞各20 g，剪碎，精细称取5 g，加80%乙醇适量，加热回流提取2次，每次2 h，收回乙醇，药渣加蒸馏水100 mL，95℃水浴提取3次，每次2 h，兼并滤液，浓缩至10 mL，加无水乙醇至溶液乙醇体积分数80%，放置24 h。过滤取沉积，并离心滤液，取沉积；兼并沉积，置25 mL容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.1.2对照品溶液的制备 精细称取枯燥至恒重的葡萄糖对照品50 mg，置500 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得浓度为0.1 mg/mL的对照品溶液。
2.2 最大吸收波长的断定
精细汲取对照品溶液和供试品溶液各1.0 mL，置试管中，补蒸馏水至2 mL，参加1 mL 5 %苯酚溶液，摇匀，敏捷参加浓硫酸5 mL，混匀，室温静置30 min待其冷却，以蒸馏水同行试剂空白，在400～600 nm波长范围内对对照品和供试品溶液别离进行扫描，成果标明两者均在490 nm处有最大吸收，故断定490 nm为测定波长。
2.3规范曲线的制作[7-9]
别离精细移取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置15 mL比色管中，按“2.2”项下办法操作，在490 nm波长下测定吸光度，以吸光度A为纵坐标，浓度C（mg/mL）为横坐标进行线性回归，回归方程为Y=7.4486X+0.0122，R2=0.9993。标明葡萄糖在（0～0.1） mg/mL浓度范围内与吸光度呈杰出的线性联系。
2.4 精细度试验
精细汲取对照品溶液1 mL，置于15 mL比色管中，其他操作按“2.2”项下办法进行，测定吸光度，平行测定6次，成果RSD为1.94%，标明仪器的精细度杰出。
2.5 安稳性试验
取浙江产枸杞适量，按“2.1.1”项下办法制备供试品溶液，精细汲取1 mL置15 mL比色管中，其他操作按“2.2”项下办法进行。别离于10、20、30、40、50、60 min后测定吸光度，成果RSD为0.16 %，标明枸杞多糖1 h内吸光度安稳，故含量测定应在显色后1 h内完结。
2.6 加样收回试验
取已知多糖含量的供试品溶液6份，别离参加适量的葡萄糖对照品溶液，定容于25 mL容量瓶中，精细移取1 mL置15 mL比色管中，其他操作按“2.2”项下办法进行，测定吸光度，核算加样收回率，得收回率平均值为99.98%，RSD为4.14%。
2.7多糖的含量测定[10，11]
别离精细移取三个产地溶液各1.0 mL，蒸馏水定容于25 mL容量瓶，摇匀后各取1 mL，置于15 mL比色管中，其他操作按“2.2”项中办法进行，并在490 nm波长处于分光光度计上测定吸光度，由回归方程核算多糖含量。
3评论
枸杞多糖是一种易溶于热水、稀酸和稀碱溶液并能被乙醇、丙酮等有机溶剂分出的蛋白多糖，其提取的办法有热水浸提、酸浸提和碱浸提等[12]，但酸性或碱性条件易引起糖苷键开裂，因而，大多选用热水浸提法。水是强极性溶剂，对植物安排的穿透力强，提取效率高，在出产上运用安全，且此办法提取设备简略、成本低、易操作。endprint
枸杞多糖因其强壮的功用活性备受国内外学者的重视，其提取技能已成为中医药、保健食物等范畴的研讨热门。枸杞多糖的提取也由传统的提取技能开展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅佐提取技能，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技能首要停留在试验室研讨阶段，需要加大研讨力度扩展规划到工业化出产。跟着问题的提出与新技能的不断老练以及多学科的穿插开展，信任枸杞多糖的提取技能必将获得长足的开展。
苯酚-硫酸法是测定多糖的常用办法，使用多糖在硫酸的效果下先水解成单糖，并敏捷脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此办法简略、灵敏度高，重复性好，试验时根本不受蛋白质存在的影响，而且发生的色彩安稳时刻长。但影响该法显色的要素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定成果更为精确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选办法。
现代药理研讨标明，枸杞多糖是枸杞的首要有效成分之一，因而经过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行点评。本试验成果标明，药用植物有效成分的构成、转化与堆集，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其间浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收成时刻、枯燥办法、储藏办法、温度、光照、地舆条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物成长发育和产质量量构成的物质能量根底，研讨环境与药用植物出产的联系，是调整药用植物出产、操控生药质量的理论根底。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，然后显现浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研讨。另一方面，药用植物体内有效成分的构成和堆集，是植物代谢进程的成果，并与其成长、发育有关。因而，中药材采收时节是影响中药原料量的关键要素，假如不进行当令的采收，必然导致中药原料差效低。
[参考文献]
[1] 刘锡建，肖稳发，曹俭，等. 枸杞多糖的研讨进展[J]. 上海工程技能大学学报，2008，22（4）：299-302.
[2] 田昕. 枸杞多糖的药理效果及其抗疲惫效果总述[J]. 甘肃科技，2009，25（24）：139-141.
[3] 朱彩平，张民，张声华，等. 枸杞多糖的组成及结构剖析[J]. 中草药，2006，37（6）：872-874.
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[9] 董琳，马小元，何志梅，等. 不同地域和采收期宁夏枸杞多糖含量比较[J]. 宁夏医学杂志，2010，32（4）：323-324.
[10] 叶玉娣. 不同等级枸杞中枸杞多糖的含量测定与比较[J]. 浙江中医杂志，2009，44（12）：921-922.
[11] 吴涛，庞坤宇，候杰，等. 枸杞多糖含量种间差异比较[J]. 北华大学学报，2013，14（5）：594-596.
[12] 李新虎. 土壤地球化学环境对宁夏枸杞质量的限制影响研讨[D]. 我国地质大学，2007.
（收稿日期：2014-01-14）endprint
枸杞多糖因其强壮的功用活性备受国内外学者的重视，其提取技能已成为中医药、保健食物等范畴的研讨热门。枸杞多糖的提取也由传统的提取技能开展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅佐提取技能，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技能首要停留在试验室研讨阶段，需要加大研讨力度扩展规划到工业化出产。跟着问题的提出与新技能的不断老练以及多学科的穿插开展，信任枸杞多糖的提取技能必将获得长足的开展。
苯酚-硫酸法是测定多糖的常用办法，使用多糖在硫酸的效果下先水解成单糖，并敏捷脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此办法简略、灵敏度高，重复性好，试验时根本不受蛋白质存在的影响，而且发生的色彩安稳时刻长。但影响该法显色的要素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定成果更为精确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选办法。
现代药理研讨标明，枸杞多糖是枸杞的首要有效成分之一，因而经过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行点评。本试验成果标明，药用植物有效成分的构成、转化与堆集，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其间浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收成时刻、枯燥办法、储藏办法、温度、光照、地舆条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物成长发育和产质量量构成的物质能量根底，研讨环境与药用植物出产的联系，是调整药用植物出产、操控生药质量的理论根底。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，然后显现浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研讨。另一方面，药用植物体内有效成分的构成和堆集，是植物代谢进程的成果，并与其成长、发育有关。因而，中药材采收时节是影响中药原料量的关键要素，假如不进行当令的采收，必然导致中药原料差效低。
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[12] 李新虎. 土壤地球化学环境对宁夏枸杞质量的限制影响研讨[D]. 我国地质大学，2007.
（收稿日期：2014-01-14）endprint
枸杞多糖因其强壮的功用活性备受国内外学者的重视，其提取技能已成为中医药、保健食物等范畴的研讨热门。枸杞多糖的提取也由传统的提取技能开展为超声波、微波、生物酶、发酵等辅佐提取技能，但各自仍存在一些问题。此外，枸杞多糖的提取新技能首要停留在试验室研讨阶段，需要加大研讨力度扩展规划到工业化出产。跟着问题的提出与新技能的不断老练以及多学科的穿插开展，信任枸杞多糖的提取技能必将获得长足的开展。
苯酚-硫酸法是测定多糖的常用办法，使用多糖在硫酸的效果下先水解成单糖，并敏捷脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。此办法简略、灵敏度高，重复性好，试验时根本不受蛋白质存在的影响，而且发生的色彩安稳时刻长。但影响该法显色的要素较多，对不同多糖物质，其最佳显色条件不同。苯酚-硫酸法测定成果更为精确合理，可考虑作为枸杞子中多糖含量测定的首选办法。
现代药理研讨标明，枸杞多糖是枸杞的首要有效成分之一，因而经过枸杞多糖含量检测可以对枸杞质量进行点评。本试验成果标明，药用植物有效成分的构成、转化与堆集，受着环境条件的影响。不同产地枸杞中所含多糖含量略有差异，其间浙江枸杞多糖含量为0.830%，宁夏枸杞多糖含量为0.769%，四川枸杞多糖含量为0.590%。其原因可能与收成时刻、枯燥办法、储藏办法、温度、光照、地舆条件、土壤条件、湿度、地貌、水质等[10]有关。环境是药用植物成长发育和产质量量构成的物质能量根底，研讨环境与药用植物出产的联系，是调整药用植物出产、操控生药质量的理论根底。浙江枸杞的多糖含量最高，高于药典收载的宁夏枸杞多糖含量，然后显现浙江枸杞有较高的药用价值，但其是否优于宁夏枸杞还有待进一步研讨。另一方面，药用植物体内有效成分的构成和堆集，是植物代谢进程的成果，并与其成长、发育有关。因而，中药材采收时节是影响中药原料量的关键要素，假如不进行当令的采收，必然导致中药原料差效低。
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（收稿日期：2014-01-14）endprint
