黄绮文++++++黄鸣剑++++++熊佳华++++赖兆新+++++林金梅
[摘要] 意图 评论8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）在早产儿喂食不耐受患者中的表达和含义。 办法 将98例早产儿分为喂食不耐受组（48例）和对照组（50例），搜集外周血和尿液，选用ELISA办法检测8-OHdG的表达。 成果 喂食不耐受组早产儿外周血8-OHdG，第1、7、14天尿8-OHdG的表达显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）。 定论 应激（DNA氧化危害）可能参加了早产儿喂食不耐受的发病，应激可能是早产儿喂食不耐受的发病机制之一；8-OHdG是评价早产儿喂食不耐受的参阅目标。
[关键词] 早产儿；喂食不耐受；应激；8-羟基脱氧鸟苷
[中图分类号] R722.6[文献标识码] B[文章编号] 1674-4721（2014）06（b）-0179-03
Expression and significance of 8-OHdG in preterm infant with feeding intolerance
HUANG Qi-wen1 HUANG Ming-jian1 XIONG Jia-hua1 LAI Zhao-xin1 LIN Jin-mei2
1.Department of Pediatrics,Maternity and Child Health Care Hospital of Haizhu District in Guangzhou City,Guangzhou 518172,China;2.Rydell Biotechnology Co.,Ltd. in Guangzhou,Guangzhou 510330,China
[Abstract] Objective To explore the expression and significance of 8-Hydroxy-2′-deoxyguanine (8-OHdG) in preterm infant with feeding intolerance. Methods 98 cases of preterm infant were divided into feeding intolerance group (48 cases) and control group (50 cases),expression of 8-OHdG in peripheral blood and urine were measured by ELISA kit between feeding intolerance group and control group. Results 8-OHdG levels in peripheral blood and in urine at day 1,7,14 in feeding intolerance group was higher than that of control group,the difference was significant (P<0.05). Conclusion DNA oxidative injury might implicate in the pathogenesis of feeding intolerance in preterm infants,stress may be involved in feeding intolerance of preterm infants. 8-OHdG might be a useful parameter for monitoring feeding intolerance in preterm infant.
[Key words] Preterm infant;Feeding intolerance;Stress;8-Hydroxy-2′-deoxyguanine
喂食不耐受是早产儿常见的并发症，易引起坏死性小肠结肠炎等严峻后果，其临床特色为腹胀、吐逆和血便等。早产儿从全胃肠外养分向全肠道喂食的改变应该缓慢，而相关前期确诊的循证医学根据尚不齐备，假如呈现肠道喂食不耐受体现常促进健康护理小组中止喂食，而延长了肠道外养分的保持时刻，因而感染等并发症的发作添加[1-3]。
早产儿喂食不耐受病因杂乱，其机制仍不清楚。成年人脑-肠道相互效果是重症监护患者肠道喂食不耐受的重要机制，应激激素和细胞因子表达可引起肠道养分效应和下降危害效果[4-5]。早产儿前期肠道喂食能够养分不老练的胃肠系统和下降肠道危害，经过按捺肠道通透性、下降再灌注危害和阻断绒毛萎缩。有报导提示，应激反响可能是喂食不耐受的重要发病机制，体现为应激激素和DNA氧化危害添加，8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2′-deoxyguanine，8-OHdG）是活性氧危害DNA的重要标志[6-7]。因而，本研讨以喂食不耐受早产儿为研讨目标，调查8-OHdG在喂食不耐受早产儿血液、唾液和尿液的表达改变状况，评论应激（氧化危害）在早产儿喂食不耐受发病中的效果及机制。
1 材料与办法
1.1 一般材料
选取2012年1～12月广州市海珠区妇幼保健院重生儿科早产儿（妊娠周<36周）98例，其间男51例，女47例，年纪7 h～32 d，以有无兼并喂食不耐受分为喂食不耐受组（兼并喂食不耐受）（48例）和对照组（50例）。喂食不耐受界说为[8]：①频频吐逆（≥3次/d）；②奶量不增或削减（>3 d）；③胃潴留量>前次喂食量的1/3。呈现腹胀、腹泻、血便、腹部压痛、肠鸣音削弱或消失等显着消化道症状，及时扫除重生儿败血症、重生儿坏死性小肠结肠炎、外科急腹症等，扫除入院前兼并消化系统疾病、先天变形患儿。一切病例均经患儿家长签署书面知情同意书。
1.2 办法
早产儿喂食计划参阅北京协和医院的重生儿医治惯例[8]，肠外养分计划参照相关文献[8]，按不同日龄及体重决议液体、葡萄糖、脂肪、氨基酸的摄入量。记载每日奶量、热量、黄疸持续时刻、体重添加等临床目标。两组均在活跃医治原发疾病的基础上，根据病况给予禁食、胃肠减压、保暖、保持水电解质和酸碱平衡等支撑对症医治。喂食不耐受组在一般医治基础上加用小剂量红霉素和潘立酮，喂奶前半小时胃管内注入，两药替换使用，连用5～7 d。
1.3 测定外周血和尿液8-OHdG的表达水平
8-OHdG检测参照生产厂家供给的操作说明书，人8-OHdG ELISA测定试剂盒购自上海凯博生化试剂有限公司，取50 μl稀释好的样品参加8-OHdG抗体包被的酶标板中，悄悄晃动混匀，37℃孵育60 min，弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振动30 s，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干后，参加每孔先参加显色剂A 50 μl，再参加显色剂B 50 μl，悄悄震动混匀，37℃避光显色15 min。取出酶标板，每孔加停止液50 μl，停止反响（此刻蓝色立转黄色）。以空白孔调零，在450 nm波长下丈量各孔的吸光度值（OD值），测定应在加停止液后15 min以内进行，取3孔规范化处理后的A值平均数。根据规范品的浓度及对应的OD值计算出规范曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。
endprint
1.4 统计学处理
选用SPSS 13.0 统计学软件剖析数据，计量材料以x±s表明，选用t查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
喂食不耐受组早产儿外周血8-OHdG，第1、7、14天尿8-OHdG的表达显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）（表1）。
表1 两组外周血和尿8-OHdG表达的比较（x±s）
与对照组比较，*P<0.05
3 评论
本研讨初次选用应激标志8-OHdG评论喂食不耐受早产患儿是否存在应激状态（脑肠相互效果参加其间），研讨成果显现，两组早产儿（不管有无喂食不耐受）外周血、第1天尿8-OHdG水平相对较低，外周血、第14天尿8-OHdG的表达差异有统计学含义。因为本文局限性之一是样本量相对较小，因而，往后需求进一步深化大样本研讨验证这种效果的存在和机制。本文报导喂食不耐受在早产儿的发病率和以往研讨成果相吻合[8-9]，相对而言喂食不耐受较常见于女人患儿，有些研讨者以为这可能与性别影响肠道和下丘脑垂体肾上腺轴有关，可是具体机制不详。
喂食不耐受的发病要素很杂乱，出世时低水平糖皮质激素有可能添加出世后第1周喂食不耐受的风险性，而这对皮质醇参加肠道酶的老练和转运活性，出世前使用皮质醇对早产儿的肠道通透性和活动影响更大，假如过量可能引起愈加严峻的胃肠道并发症[5]。应激时内源性皮质醇有助于保持糖代谢平衡、抗炎症反响、保持肠道膜屏障和黏膜的血液灌注和排泄。此外，第1、7、14天，两组患儿氧化应激水平存在差异（8-OHdG），第1天相对较低，提示应激标志物的散布差异有利于辨别和猜测喂食不耐受的发作。迄今为止，有关喂食不耐受氧化应激预后的专门研讨未见报导，少量作者发现高水平的氧化应激（应激）可猜测坏死性结肠炎的发作。这些研讨成果进一步提示了应激参加了早产儿喂食不耐受的发病进程[10-11]。
本研讨企图从应激、脑肠功用轴视点评论早产儿喂食不耐受的发病机制，测验选用8-OHdG作为应激标志，调查其可否当作非创伤性确诊早产儿喂食不耐受的生物标志物。本文研讨使用喂食不耐受界说和检测办法尚不完善，可能影响研讨定论的精确性；喂食不耐受的症状和体征非特异性，而其判别是片面的；还有样本量较小、标本搜集办法等要素的影响。所以，往后大样本、多生物标志物的研讨有利于深化说明应激和氧化/抗氧化系统的具体的分子效果及机制，进而判别其对早产儿或许其他人群喂食不耐受的猜测价值。
综上所述，早产儿出世后前2周应激生物标志物（8-OHdG）的表达差异能够猜测喂食不耐受的发作，这将有助于前期辨认早产儿喂食不耐受。持续深化的研讨有利于说明早产儿喂食不耐受的发病机制，为防治早产儿喂食不耐受供给新的试验根据。
[参阅文献]
[1]王立波，谢立超，纪东华，等.冠心病缓慢房颤患者血清8-OHdG水平的研讨[J].黑龙江医药科学，2012，35（6）：2-4.
[2]刘竞丽，董为伟，李劲频，等.大鼠局灶性脑缺血/再灌注后氧化性危害符号8-OHdG及其修正酶rOGG1表达的研讨[J].脑与神经疾病杂志，2003，11（4）：198-200.
[3]鲁燕，陆轶群，李红霞，等.2型糖尿病患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸水平与大血管病变的相关性[J].苏州大学学报（医学版），2007，27（5）：736-738.
[4]刘俊红，高爱武，高淑磊，等.高血压患者血清8-OHdG改变的研讨[J].我国现代医学杂志，2012，22（1）：75-76，79. [5]王剑桥，王奋平，魏惠琴，等.早产儿与喂食不耐受[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2007，3（5）：288-291.
[6]王喆，李雪竹，严海东，等.终晚期肾病中DNA氧化危害标志物8-OHdG水平的研讨[J].我国血液净化，2008，7（2）：65-68.
[7]刘志勇，易坚，邹小明，等.8-羟基脱氧鸟苷在乳腺癌中的表达及含义[J].世界免疫学杂志，2013，36（5）：408-412.
[8]陈中慧.极低出世体重儿喂食办法与胃肠功用危害发作的临床调查[J].我国现代医师，2010，48（26）：31，33.
[9]白伟伟，赵林双，向光大，等.硫辛酸抗氧化应激对糖尿病心肌病患者8-羟基脱氧鸟苷酸水平缓心功用的影响[J].临床内科杂志，2013，30（4）：237-240.
[10]余章斌，韩树萍，陈玉林，等.我国早产儿喂食不耐受风险要素的Meta剖析[J].我国重生儿科杂志，2010，25（6）：346-350.
[11]李淑志，张红敏，郭霞，等.影响早产儿喂食不耐受的相关要素剖析[J].底层医学论坛，2013，17（29）：3850-3851.
（收稿日期：2014-03-06本文修改：郭静娟）
endprint
1.4 统计学处理
选用SPSS 13.0 统计学软件剖析数据，计量材料以x±s表明，选用t查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
喂食不耐受组早产儿外周血8-OHdG，第1、7、14天尿8-OHdG的表达显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）（表1）。
表1 两组外周血和尿8-OHdG表达的比较（x±s）
与对照组比较，*P<0.05
3 评论
本研讨初次选用应激标志8-OHdG评论喂食不耐受早产患儿是否存在应激状态（脑肠相互效果参加其间），研讨成果显现，两组早产儿（不管有无喂食不耐受）外周血、第1天尿8-OHdG水平相对较低，外周血、第14天尿8-OHdG的表达差异有统计学含义。因为本文局限性之一是样本量相对较小，因而，往后需求进一步深化大样本研讨验证这种效果的存在和机制。本文报导喂食不耐受在早产儿的发病率和以往研讨成果相吻合[8-9]，相对而言喂食不耐受较常见于女人患儿，有些研讨者以为这可能与性别影响肠道和下丘脑垂体肾上腺轴有关，可是具体机制不详。
喂食不耐受的发病要素很杂乱，出世时低水平糖皮质激素有可能添加出世后第1周喂食不耐受的风险性，而这对皮质醇参加肠道酶的老练和转运活性，出世前使用皮质醇对早产儿的肠道通透性和活动影响更大，假如过量可能引起愈加严峻的胃肠道并发症[5]。应激时内源性皮质醇有助于保持糖代谢平衡、抗炎症反响、保持肠道膜屏障和黏膜的血液灌注和排泄。此外，第1、7、14天，两组患儿氧化应激水平存在差异（8-OHdG），第1天相对较低，提示应激标志物的散布差异有利于辨别和猜测喂食不耐受的发作。迄今为止，有关喂食不耐受氧化应激预后的专门研讨未见报导，少量作者发现高水平的氧化应激（应激）可猜测坏死性结肠炎的发作。这些研讨成果进一步提示了应激参加了早产儿喂食不耐受的发病进程[10-11]。
本研讨企图从应激、脑肠功用轴视点评论早产儿喂食不耐受的发病机制，测验选用8-OHdG作为应激标志，调查其可否当作非创伤性确诊早产儿喂食不耐受的生物标志物。本文研讨使用喂食不耐受界说和检测办法尚不完善，可能影响研讨定论的精确性；喂食不耐受的症状和体征非特异性，而其判别是片面的；还有样本量较小、标本搜集办法等要素的影响。所以，往后大样本、多生物标志物的研讨有利于深化说明应激和氧化/抗氧化系统的具体的分子效果及机制，进而判别其对早产儿或许其他人群喂食不耐受的猜测价值。
综上所述，早产儿出世后前2周应激生物标志物（8-OHdG）的表达差异能够猜测喂食不耐受的发作，这将有助于前期辨认早产儿喂食不耐受。持续深化的研讨有利于说明早产儿喂食不耐受的发病机制，为防治早产儿喂食不耐受供给新的试验根据。
[参阅文献]
[1]王立波，谢立超，纪东华，等.冠心病缓慢房颤患者血清8-OHdG水平的研讨[J].黑龙江医药科学，2012，35（6）：2-4.
[2]刘竞丽，董为伟，李劲频，等.大鼠局灶性脑缺血/再灌注后氧化性危害符号8-OHdG及其修正酶rOGG1表达的研讨[J].脑与神经疾病杂志，2003，11（4）：198-200.
[3]鲁燕，陆轶群，李红霞，等.2型糖尿病患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸水平与大血管病变的相关性[J].苏州大学学报（医学版），2007，27（5）：736-738.
[4]刘俊红，高爱武，高淑磊，等.高血压患者血清8-OHdG改变的研讨[J].我国现代医学杂志，2012，22（1）：75-76，79. [5]王剑桥，王奋平，魏惠琴，等.早产儿与喂食不耐受[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2007，3（5）：288-291.
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[7]刘志勇，易坚，邹小明，等.8-羟基脱氧鸟苷在乳腺癌中的表达及含义[J].世界免疫学杂志，2013，36（5）：408-412.
[8]陈中慧.极低出世体重儿喂食办法与胃肠功用危害发作的临床调查[J].我国现代医师，2010，48（26）：31，33.
[9]白伟伟，赵林双，向光大，等.硫辛酸抗氧化应激对糖尿病心肌病患者8-羟基脱氧鸟苷酸水平缓心功用的影响[J].临床内科杂志，2013，30（4）：237-240.
[10]余章斌，韩树萍，陈玉林，等.我国早产儿喂食不耐受风险要素的Meta剖析[J].我国重生儿科杂志，2010，25（6）：346-350.
[11]李淑志，张红敏，郭霞，等.影响早产儿喂食不耐受的相关要素剖析[J].底层医学论坛，2013，17（29）：3850-3851.
（收稿日期：2014-03-06本文修改：郭静娟）
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1.4 统计学处理
选用SPSS 13.0 统计学软件剖析数据，计量材料以x±s表明，选用t查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
喂食不耐受组早产儿外周血8-OHdG，第1、7、14天尿8-OHdG的表达显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.05）（表1）。
表1 两组外周血和尿8-OHdG表达的比较（x±s）
与对照组比较，*P<0.05
3 评论
本研讨初次选用应激标志8-OHdG评论喂食不耐受早产患儿是否存在应激状态（脑肠相互效果参加其间），研讨成果显现，两组早产儿（不管有无喂食不耐受）外周血、第1天尿8-OHdG水平相对较低，外周血、第14天尿8-OHdG的表达差异有统计学含义。因为本文局限性之一是样本量相对较小，因而，往后需求进一步深化大样本研讨验证这种效果的存在和机制。本文报导喂食不耐受在早产儿的发病率和以往研讨成果相吻合[8-9]，相对而言喂食不耐受较常见于女人患儿，有些研讨者以为这可能与性别影响肠道和下丘脑垂体肾上腺轴有关，可是具体机制不详。
喂食不耐受的发病要素很杂乱，出世时低水平糖皮质激素有可能添加出世后第1周喂食不耐受的风险性，而这对皮质醇参加肠道酶的老练和转运活性，出世前使用皮质醇对早产儿的肠道通透性和活动影响更大，假如过量可能引起愈加严峻的胃肠道并发症[5]。应激时内源性皮质醇有助于保持糖代谢平衡、抗炎症反响、保持肠道膜屏障和黏膜的血液灌注和排泄。此外，第1、7、14天，两组患儿氧化应激水平存在差异（8-OHdG），第1天相对较低，提示应激标志物的散布差异有利于辨别和猜测喂食不耐受的发作。迄今为止，有关喂食不耐受氧化应激预后的专门研讨未见报导，少量作者发现高水平的氧化应激（应激）可猜测坏死性结肠炎的发作。这些研讨成果进一步提示了应激参加了早产儿喂食不耐受的发病进程[10-11]。
本研讨企图从应激、脑肠功用轴视点评论早产儿喂食不耐受的发病机制，测验选用8-OHdG作为应激标志，调查其可否当作非创伤性确诊早产儿喂食不耐受的生物标志物。本文研讨使用喂食不耐受界说和检测办法尚不完善，可能影响研讨定论的精确性；喂食不耐受的症状和体征非特异性，而其判别是片面的；还有样本量较小、标本搜集办法等要素的影响。所以，往后大样本、多生物标志物的研讨有利于深化说明应激和氧化/抗氧化系统的具体的分子效果及机制，进而判别其对早产儿或许其他人群喂食不耐受的猜测价值。
综上所述，早产儿出世后前2周应激生物标志物（8-OHdG）的表达差异能够猜测喂食不耐受的发作，这将有助于前期辨认早产儿喂食不耐受。持续深化的研讨有利于说明早产儿喂食不耐受的发病机制，为防治早产儿喂食不耐受供给新的试验根据。
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[2]刘竞丽，董为伟，李劲频，等.大鼠局灶性脑缺血/再灌注后氧化性危害符号8-OHdG及其修正酶rOGG1表达的研讨[J].脑与神经疾病杂志，2003，11（4）：198-200.
[3]鲁燕，陆轶群，李红霞，等.2型糖尿病患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸水平与大血管病变的相关性[J].苏州大学学报（医学版），2007，27（5）：736-738.
[4]刘俊红，高爱武，高淑磊，等.高血压患者血清8-OHdG改变的研讨[J].我国现代医学杂志，2012，22（1）：75-76，79. [5]王剑桥，王奋平，魏惠琴，等.早产儿与喂食不耐受[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2007，3（5）：288-291.
[6]王喆，李雪竹，严海东，等.终晚期肾病中DNA氧化危害标志物8-OHdG水平的研讨[J].我国血液净化，2008，7（2）：65-68.
[7]刘志勇，易坚，邹小明，等.8-羟基脱氧鸟苷在乳腺癌中的表达及含义[J].世界免疫学杂志，2013，36（5）：408-412.
[8]陈中慧.极低出世体重儿喂食办法与胃肠功用危害发作的临床调查[J].我国现代医师，2010，48（26）：31，33.
[9]白伟伟，赵林双，向光大，等.硫辛酸抗氧化应激对糖尿病心肌病患者8-羟基脱氧鸟苷酸水平缓心功用的影响[J].临床内科杂志，2013，30（4）：237-240.
[10]余章斌，韩树萍，陈玉林，等.我国早产儿喂食不耐受风险要素的Meta剖析[J].我国重生儿科杂志，2010，25（6）：346-350.
[11]李淑志，张红敏，郭霞，等.影响早产儿喂食不耐受的相关要素剖析[J].底层医学论坛，2013，17（29）：3850-3851.
（收稿日期：2014-03-06本文修改：郭静娟）
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