丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值.pdf
贾艳艳 张永良
【中图分类号】R687 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2017）03-0-01
目前，丙型肝炎病毒（HCV）感染已呈世界性分布，严重影响了人类的健康，是人类慢性肝炎、肝硬化、肝癌发生的重要病因[1]。我国丙型肝炎约占输血后肝炎的60%～80%，丙型肝炎的感染率仅次于乙型肝炎。丙型肝炎自然转阴率低，治疗效果差，病程迁延，且与肝硬化、肝癌显著相关[2]。因此，早期的检测及诊断治疗对预防和控制丙型肝炎的传播尤为重要。目前，丙肝的实验室诊断主要有酶联免疫吸附试验法（ELASA法）、胶体金免疫层析法（金标法）和逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR法），其中，前两者用于检测丙肝病毒抗体，后者用于检测丙肝病毒RNA。本文旨在分析这三种检测方法在临床应用中对丙型肝炎的诊断价值。
1.资料和方法
1.1 研究对象：对2015年5月1日至2016年12月11日来我院就诊的38017名住院及门诊患者血清采用ELASA法或金标法进行丙肝抗体筛查试验，阳性373例，其中，男212例，女161例，平均年龄43.9岁。之后对阳性标本分别用三种方法进行复查。
1.2 试剂方法：①酶联免疫吸附试验法（ELASA法）：采用北京万泰生物药业股份有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒；②胶体金免疫层析法（金标法）：采用英科新创科技有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒；③逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR法）：采用中山达安基因有限公司生产的丙型肝炎病毒RNA诊断试剂盒，所用基因扩增仪为ABI7500。各项操作严格按照试剂说明书进行。
2.结果
利用ELASA法或金标法进行丙肝抗体初筛试验，共复查373例样本，其中，142例ELASA法、金标法和RT-PCR法三者均阳性，即该类人群处于丙肝病毒复制期，传染性强；100例ELASA法和金标法阳性但RT-PCR法阴性，此系各种原因导致的丙肝病毒RNA缺失所致（详见讨论）；131例金标法阳性但ELASA法和RT-PCR法阴性，此类标本系金标检测法敏感性高而特异性偏低所致，即所谓假阳性结果。
3.讨论
丙型肝炎病毒感染是一种持续性的终生感染，主要通过输血传播，目前尚无有效疫苗进行预防。诊断丙型肝炎主要从两个方面去考量：首先要检测抗HCV抗体和丙肝病毒核糖核酸等丙肝相关标志物是否为阳性，还要做超声检测及肝脏功能生化检测等检查，完成上述两个方面即可诊断丙肝[3-5]。实验室及时准确的检测结果对丙肝的临床诊疗尤为重要。
目前，丙肝抗体检测已成为一个非常有效而普遍的实验室检测方法，尤其ELISA法检测丙肝抗体诊断试剂盒发展己较为成熟，大大缩短了血清学窗
口期，检测成本低廉，具有较高的灵敏度，临床应用广泛，已成为临床上首选的丙肝抗体筛查试验方法。但是由于丙肝感染者血中的丙肝病毒浓度低，抗体反应弱而晚，血清抗HCV抗体在感染后平均18周才阳转，故急性肝炎患者抗HCV抗体阴性并不能完全排除丙肝病毒感染，而慢性肝炎患者抗HCV抗体可持续多年。用常规试剂盒检出的抗HCV抗体并非保护性抗体，它的检出只说明血液有传染性。抗病毒治疗后，抗HCV抗体一般不会在短期内转阴。
金标法检测丙肝抗体操作方法较简单、快速，适合单个检测，但试剂成本较高，可用于急诊检测或快速筛查，也可用作为ELISA法阳性标本的校核试验以排除试验中人为因素造成的假阳性，该法敏感性高而特异性低，容易出现假阳性结果，如本文所指，131例假阳性标本出现，因此金标法可疑阳性的结果必须要用ELISA法进行复查。
HCVRNA检测对实验室条件的要求较高，一般可在病毒感染后数日便可检出，特异性很高，但是并不可以完全替代ELISA法，有报道显示仅有55%的抗HCV抗体阳性者能够检出HCVRNA[6]。其可能的原因有：①HCV有可能发生自发性丢失；②HCV基因多样性或HCV基因突变性等降低了RT-PCR方法的敏感性；③因操作复杂、仪器昂贵，对实验条件和技术人员素质要求较高，由于操作不当造成污染或RNA酶的降解都会影响实验结果；④在血清抗体阳转以后，血清中的病毒载量可能降至极低水平，使HCVRNA的结果呈阴性[7]。本资料显示，242例ELASA法和金标法阳性样本中HCVRNA阳性标本只有142例，占58.7%，不排除有上述各原因存在。血清中HCVRNA的检出，表明血液中存在丙肝病毒，是具备传染性的直接证据。RT-PCR法常用于评价抗病毒药物的疗效及研究HCVRNA复制水平与肝脏病变的关系，HCVRNA含量可作为监测肝内HCVRNA复制程度的一个指标。抗病毒治疗后如HCVRNA转阴，则是治疗有效的根据。
综上所述，丙型肝炎常用的三种检测方法各有利弊，聯合检测有利于提高丙肝的阳性检出率，并且能够降低ELASA法和金标法的假阳性率。对于急诊的病人或者需要快速筛查的病人可先用金标法进行抗体筛查，阳性者用ELASA法进行确认，之后再用RT-PCR法进行HCVRNA定量检测。对临床住院及门诊病人应首选ELASA法对丙肝抗体进行初筛，并对阳性标本应用胶体金法进行验证试验，两种方法均阳性则用RT-PCR法进行HCVRNA定量检测加以确认。对于确认患丙型肝炎的病人应定时检测HCVRNA进行抗病毒疗效监测，以协助临床对丙肝病毒感染者的早发现、早治疗。
参考文献
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