小儿肺炎合剂的质量控制.doc
孟军+戚颖欣
【摘要】麻黄为本处方中的主药，其主要成分为麻黄碱、伪麻黄碱等。具有散风寒，宣肺气，治痰核，与本品的功效主治有密切关系。参照《中国药典》2015年版一部麻黄及小青龙合剂含量测定项下麻黄的含量测定方法，采用高效液相色谱法测定麻黄中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的含量，方法易于操作，结果准确，重现性良好可以用来控制本制剂的质量。
【关键词】盐酸麻黄碱；盐酸伪麻黄碱；高效液相色谱法
【中图分类号】R943.1 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2016.29.0.01
1 仪器与试药、色谱条件
日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品批号依次为：171241-201007、171237-201208；规格：供含量测定用含量分别以99.7%、99.9%计。乙腈为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。色谱柱：HyPpersil BDS C18（4.6×200 mm，5 μm）；流动相：乙腈-含0.3%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节至pH3.0）（4：96）；流速：0.8 ml/min；柱温：26℃；检测波长：210 nm；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4100。
对照品溶液的制备：精密称定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱对照品适量，加0.01 mol/L盐酸溶液制成盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别约为90 μg/ml和30 μg/mL的混合溶液。
供试品溶液的制备：精密量取本品10 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液5 mL，至中性氧化铝柱（100～200目，3 g，内径为l.5 cm）上，用乙醇60 mL洗脱，洗脱液蒸干，残渣用60%甲醇2 mL溶解移至5 mL量瓶中，用0.01 mol/L盐酸溶液稀釋至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2 系统适用性试验
2.1 测定波长的选择
取对照品溶液，经TU-1900型紫外可见分光光度计在190.0～400.0 nm分别测定，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱在194.0、199.1 nm波长处，有最大吸收，考虑到高效液相色谱仪紫外检测器在此处吸收弱，则选择206.7 nm左右的宽幅吸收处，同时参照《中国药典》麻黄项下含量测定的检测波长，故选择210.0 nm为测定波长。
2.2 柱的选择及柱效的考察
采用依利特HyPpersil BDS C18（4.6×200 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-含0.3%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节至PH3.0）（4：96）为流动相；检测波长为210 nm；柱温：25℃。盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品及供试品的分离度符合规定且理论板数均较高。根据检测结果，同时参照《中国药典》中相关含量测定项下麻黄的含量测定方法，确定本品理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4100。
2.2.1 阴性试验
为验证试验的合理性，取不含麻黄药材的阴性对照试样。依正文方法进行检测。结果，该试样在与对照品色谱峰相应的保留时间处无干扰峰检出，证明本方法可靠。
2.2.2 精密度试验
精密量取对照品溶液20 μL，注入液相色谱仪，重复6次，根据其色谱峰面积值，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱峰面积RSD分别为1.1%、1.1%，结果表明所用仪器精密度良好。
2.2.3 重复性试验
取同一试样，依正文方法分别测定6份，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量平均值及RSD分别为0.224 mg/m、RSD1.5%、0.070 mg/mL、RSD1.9%，结果表明本法具良好的重复性。
2.2.4 稳定性试验
取供试品溶液，按正文方法测定，盐酸麻黄碱结果峰面积RSD0.7%，盐酸伪麻黄碱结果峰面积RSD1.8%，结果表明72 h内试样溶液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量稳定。
3 标准曲线制备
分别精密称取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品用0.01 mol/L盐酸适量溶解成1 mg/mL的贮备液。分别精密吸取贮备液0.9 mL和0.3 mL置10 mL量瓶中，加0.01 mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述溶液（μL）5、8、10、15、20注入高效液相色谱仪测定，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，盐酸麻黄碱标准曲线回归方程y=35.05x+0.402 （r=1.0），盐酸伪麻黄碱标准曲线回归方程y=33.99x+0.295（r=0.9993），结果表明盐酸麻黄碱在0.442～1.633 μg，呈线性关系，盐酸伪麻黄碱在0.152～0.616 μg，呈线性关系，符合外标法定量测定的要求。
4 回收率试验
精密称取已知含量的供试品（批号：20150328含量为0.2238 mg/mL）9份，每三份分别精密加入盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品溶液（0.2299 mg/mL、0.0675 mg/mL）4 mL、5 mL、6 mL，依法测定，计算回收率，测得盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的平均回收率为98.7%、99.8%，RSD分别为1.1%、1.4%结果表明本法回收率良好。
5 试样限度测定
依正文方法测定三批试样， 参照《中国药典》一部中麻黄药材的含量限度，小青龙合剂等制剂中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的转移率为26%左右，而该样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的转移率为46%，根据三批样品的含量测定结果，暂定本品每1 mL含麻黄以盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量计，不得少于0.180 mg。
本文编辑：赵小龙
