...F对脑局部缺血再灌注大鼠脑组织神经元凋亡及PKCmRNA表达的调...
高霏
【摘要】目的：研究丹参酮对脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织Na + -K + -ATP的作用。方法：将大鼠随机分为假手术组，模型组和丹参酮组， 测定各组大鼠脑指数、 脑组织含水量、 脑组织中Na + -K + -ATP、 Ca2 + -ATP等指标量。 结果： 与正常组相比，脑组织含水量， h2 O2 及 MDA 含量明显升高， SOD、 GSH-Px、 Na + -K + -ATP、 Ca2 + -ATP 等酶的活力明显降低；与模型组比较，丹参酮组大鼠脑组织含水量， h2 O2 及 MDA 含量明显降低， SOD、 GSH-Px、 Na + -K + -ATP、 Ca2 + -ATP 等酶的活力明显升高。结论： 丹参酮可减轻受损组织中的水肿及氧化应激损伤，可能是通影响 Na + -K + -ATP、 Ca2 + -ATP 酶的变化而实现的。
【关键词】丹参酮；脑缺血再灌注； Na + -K + -ATP
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）07-0-01
脑缺血是短暂性或持久性的神经功能缺损症状为其临床表现，发病率、致残率、复发率均交高[1]，脑缺血再灌注为脑梗死疾病的重要病理生理过程，与氧化应激有着重要的关系。丹参酮是丹参的有效活性组分，，目前，对丹参酮的研究，主要抗炎、抗肿瘤以及心血管疾病等方面的研究，丹参酮可通过抑制白细胞功能而起到防治脑梗塞的作用。因此，本实验主要观察丹参酮对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Na+-K+-ATP、Ca2+-ATP的影响，初步探讨丹参酮治疗脑缺血再灌注损伤的保护作用的。
1.实验材料
1.1动物及分组
健康清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，50只，体重200～250g，随机将大鼠随机分为：假手术组、模型对照组，丹参酮组。丹参酮组分别灌胃给予相应药物，给药体积为（25mg/kg.），1次/d，模型对照组和假手术组给予等体积生理盐水，用药7d，造模后继续给药2d。
2.模型制备
动物麻醉后，仰卧固定，颈部正中做2cm的切口，分离两侧颈总动脉和右侧颈总静脉。夹闭右侧颈总静脉近心段，在远心端剪口，插入导管，输入肝素化生理盐水，抽取血液，用动脉夹夾闭两侧颈总动脉30min，之后缓慢回输血液，处理伤口。假手术组大鼠手术步骤同模型组，但不夹闭双侧颈总动脉，不抽取血液。
3.观察指标
3.1 大鼠脑组织匀浆检测Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶等含量的测定
将脑组织放于玻璃匀浆器中，制备组织匀浆，以5000rpm离心5min，并取上清液，检测Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶、GSH-Px、SOD、CAT酶活力以及MDA、H2O2含量，实验操作严格按相应测试盒说明书进行操作。
3.2 大鼠脑指数及脑组织中含水量测定麻醉后取脑组织，脑干重量是通过放置于烘箱中100℃、24h制备。脑指数（g/100g）=脑湿重（g）*100/体重（100g）。含水量=（脑湿重量-脑干重量）/脑湿重量*100%。
4.结果
4.1各组大鼠MDA、H2O2含量及SOD、GSH-Px活力的影响
与假手术组相比，模型组大鼠MDA、H2O2含量明显增加，SOD、GSH-Px活力明显降低，差异显著p<0.05；与模型组相比，丹参酮组大鼠MDA、H2O2含量明显降低，SOD、GSH-Px活力明显增加，差异显著p<0.05；
4.2 各组大鼠脑指数、脑组织含水量以及ATP酶活性等的影响
模型组大鼠脑组织含水量、脑指数以及ATP酶活性明显增加，与假手术组相比，差异显著p<0.05；与模型组相比，丹参酮组大鼠脑组织含水量、脑指数以及ATP酶活性明显降低，p<0.05。
5.讨论
当脑缺血发生时，氧自由基则会损伤血脑屏障，促进脑水肿的形成，再灌注时则导致微血管周围有大量自由基产生。因此自由基损伤是脑缺血再灌注损伤的重要机理之一，在自由基产生过程中，MDA是氧自由基引发的过氧化反应的代谢产物；SOD、GSH-Px是机体产生的自由基清除酶，H2O2作为一种强氧化剂，可以产生一系列新的氧化性活跃物质即自由基[2、3]。本实验结果表明脑缺血再灌注大鼠脑组织中氧化产物H2O2、MDA明显增加，GSH-Px、SOD活性明显下降。丹参酮则可以明显增加上述指标。
另外，Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶可以维持细胞的正常结构和功能方面。脑缺血再灌注时，大鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性下降，而丹参酮则可以明显增加上述指标。因此丹参酮可以降低脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量，保护缺血脑组织，可能是通过改变Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性来起作用的。
参考文献
[1]兰晶，潘敬芳.姜黄素对脑缺血再灌注损伤大鼠PI3K/AKT/mTOR的影响[J].重庆医学，2017，46（1）：36-39.
[2]王君，曾文斌，岳惠玉，党莎杰，韩丽春.氢饱和生理盐水治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的效果研究[J].现代生物医学进展，2017，17（3）：433-437.
[3]李鹏飞，沈梅红，吴锦萍，张春兵.川芎嗪抑制大鼠脑缺血再灌注损伤的机制[J].中国老年学杂志，2017，37（7）：1561-1565.
