在体小肠对氧氟沙星的吸收动力学研究
菲索查克+蒋伟哲+黄兴振
【摘要】目的：通过大鼠在体小肠吸收实验方法，研究汉防己甲素（TET）大鼠小肠吸收动力学。方法：采用大鼠在体肠循环方法求算药物的吸收速率。结果：TET在大鼠小肠内一级吸收速率常数ka为0.7080h-1，吸收半衰期t1/2为0.9790h，剩余百分数R%为26.51%，单位时间吸收百分率P%为36.75%。结论：TET在大鼠中吸收差。
【关键词】汉防己甲素；高效液相色谱法；在体小肠吸收
【中图分类号】R282.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）12-00-01
汉防己甲素（又名粉防己碱tetrandrine，TET） 是从粉防己的干燥块根中提取出来的一种双苄基异喹啉类生物碱，也是含量最高的生物碱[1]。TET具有消炎、镇痛、降压、扩张冠脉、抗矽肺、抗凝血、抗炎、抗免疫、抗过敏、降血糖等作用[2-4]。本试验通过建立大鼠在体小肠[5]实验模型，考察TET的吸收在大鼠的吸收情况，为该药物的药代动力学研究提供参考。
1 仪器与材料
LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；UV-2201紫外分光光度计（日本岛津）；TET（江西金芙蓉药业有限公司，纯度≥98%，批号： 150402）；TET对照品（中国食品药品检定研究院，批号： 110711-200708）；甲醇为色谱纯，K-R试液为自制，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 循环液的配制
TET对照品循环液：取适量TET对照品，用酚红K-R液稀释成质量浓度为10 mg·L -1的溶液，超声溶解30min，即得；TET原料药循环液：取适量TET原料药，用酚红K-R液稀释成质量浓度为80 mg·L -1的溶液，超声溶解30min，即得。
2.2 酚红标准曲线
取酚红10 mg，精密称定，用K-R试液稀释至100 mL，作为贮备液。精密量取贮备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，用K-R试液稀释至10 mL，得浓度为10，20，30，40，50mg·L -1的酚红对照品溶液。取各溶液0.5mL加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液5 mL显色，在波长555nm处测定吸收度。以吸收度A为纵坐标，浓度C（mg/L）为横坐标进行线性回归，得方程：A=0.1695C+0.0103，r=0.9998。
2.3 汉防己甲素HPLC含量测定方法的建立
2.3.1 色谱条件
色谱柱：AichmmBond-1C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：0.06% 二乙胺甲醇-水（ 80：20 ）；流速：1mL/min；检测波长：282 nm；柱温：25℃；进样量：20 μL[6]。
2.3.2 系统适用性试验
空白溶液：取酚红空白肠循环液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度即得；对照品溶液：取TET对照品循环液100mL进行肠循环2h，摇匀，取上述循环液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度即得；供试品溶液：取TET原料药循环液100mL进行肠循环2h，摇匀，取上述循环液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度即得。3个溶液按色谱条件进样测定。结果显示供试品溶液主峰保留时间与对照品一致，空白无干扰。
2.3.3 标准曲线
精密称定TET对照品适量，配成10mg·L -1的水溶液，精密吸取0.1，0.5，1.0，2.0，4.0 mL上述溶液，分别置10mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，分别得到质量浓度为0.1，0.5，1.0，2.0，4.0mg·L -1的系列对照品溶液，进样测定，以峰面积A对浓度C（mg·L -1 ）进行线性回归，得方程A =16531C +507.98 （r=0.99995）。
2.3.4 精密度
取低、中、高3个质量浓度（0.1，1.0，4.0mg·L -1）的TET溶液，测定日内和日问精密度（ n=6）。结果表明，日内RSD分别为0.87%，0.95%，1.22%；日间RSD分别为1.54%，1.28%，1.35%。
2.3.5 稳定性
取供试品溶液，37℃水浴放置，于0，15，30，45，60min取样测定。结果汉防己甲素质量浓度RSD为1.84% （n=5），表明供试品溶液在60min内稳定性良好。
2.4.1 实验方法
大鼠称重，麻醉后加以固定。沿大鼠腹部中线打开腹腔，在十二指肠上部和回肠下部各切一小口，插入直径为0.3cm的塑料管，结扎，并洗去肠管内容物至净。将肠管两端的塑料管与胶管连接成回路。
用37℃的K-R试液以5mL·min-1流速循环10min后，然后用TET原料药循环液以5mL·min-1流速循环5min后，将流速调节为2.5mL·min-1，立即取样两份（1mL和0.5mL各一份）分别作为TET和酚红零时间样品，另向烧瓶中补充酚红K-R循环液2.0mL，每隔15min，按同法取样及补加酚红K-R循环液，共取样9次，停止循环。
2.4.2 样品测定
TET使用HPLC按“2.3.1”项下色谱条件进样测定；酚红使用UV在555nm波长处测定吸收度。
2.4.3 数据处理
通过求算出汉防己甲素的浓度及酚红的浓度按一级速率方程计算各吸收参数。
2.4.4 结果和结论
根据测定汉防己甲素在6只SD大鼠小肠内各时间段的药物浓度，计算出吸收常数值如表1。
汉防己甲素在大鼠小肠内ka为0.7080h-1，t1/2为0.9790h，R%为26.51%，P%为36.75%。说明其吸收率较低。在之后的研究中，可尝试通过改变药物剂型、加入药物促吸剂等方法提高药物的吸收率。
参考文献：
田代华主编.实用中药辞典（上卷）.北京：人民卫生出版社，2002.801
CHEN Yu-Jen.Potential role of tetrandrine in cancer therapy.ActaPharmacol Si n，2002， 23 （ 12） ：1102-1106
常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册.北京：学苑出版社，2002，961
Chen K，Chen AL.The alkaloids of Han-Fang-Chi.JBiol Chem，1935，109：681-685
張怡，屈勇. 丹参素的大鼠在体肠吸收动力学研究[J]. 中国现代应用药学，2013，12：1295-1299.
冯碧敏，叶云，张昊.高效液相色谱法测定防己中粉防己碱含量[J].中国药业，2005，11：36-37.endprint
