靶病灶最佳退缩情况如下,无论患者的PD-L1表达水平,均观察到客...
刘宇晴+曹艳
【摘要】目的：分析胃癌组织中PD-L1和PD-1的表达情况，并探讨其与患者临床病理、预后生存之间的关系。方法：选取我院2011年6月到2012年6月间收治的胃癌患者100例作为研究对象，通过免疫组化法对术区病理组织标本、癌旁组织标本进行染色分析，计算PD-L1、PD-1的表达阳性率，并分析PD-L1、PD-1阳性结果与患者的病理特征、5年生存率之间的关系。结果：观察组和对照组标本中的PD-L1阳性率，PD-1阳性率，二者的表达结果之间无相关性。随着pTNM分期的升高，累及范围的增大，淋巴结转移的发生，PD-L1的阳性率不断升高，且不同亚组的比较有统计学差异，P<0.05；但PD-1的阳性率在各亚组组间比较无统计学差异（P>0.05）。PD-L1、PD-1阳性患者的生存率均显著低于阴性患者，比较均有统计学意义（P<0.05）。结论：通过胃癌组织中PD-L1、PD-1表达情况的分析，可以对患者的临床病理特征、预后情况进行预测。
【关键词】PD-L1；PD-1；胃癌组织；病理；预后生存
【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）12-00-01
本文就我院2011年6月到2012年6月间收治的胃癌患者100例作为研究对象，分析胃癌组织中PD-L1和PD-1的表达情况，并探讨其与患者临床病理、预后生存之间的关系。具体报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2011年6月到2012年6月间收治的胃癌患者100例作为研究对象，患者均接受胃癌根治手术治疗，术前未放化疗治疗史，且不合并远处转移的情况。患者在术后经病理检查确诊。所有临床病历资料完整有效。
患者中，男57例，女43例；患者的年龄在23到72岁之间，平均年龄为（52.1±4.2）岁。按照AJCC胃癌TNM分期标准对患者进行分型，则Ⅰ-Ⅱ期的患者59例、Ⅲ-Ⅳ期的患者41例；患者的浸润情况分布为：累及黏膜及黏膜下层的患者22例，累及肌层的患者25例，累及浆膜层的患者43例；其中，合并淋巴结转移的患者45例。
1.2 方法
将患者的手术区病理组织标本作为观察组，与肿瘤组织距离超过5cm的癌旁组织标本作为对照组，采用免疫组织化学二步法分别对两组的标本进行处理，先对标本石蜡块进行连续切片，常规脱蜡和水化处理后，室温条件下以3%的过氧化氢溶液作用十分钟并使用PBS 缓冲液冲洗三遍，再于柠檬酸盐缓冲液中微波加热20min，实现抗原修复，加热接受后自然冷却，以PBS 缓冲液冲洗三遍后滴加兔抗人PD-L1 以及鼠抗人PD-1 多克隆抗体，以1：200的比例稀释，并在4℃的条件下孵育过夜，PBS 缓冲液冲洗三遍后，在切片中滴加北京中杉金桥生物科技有限公司生产的PV-6000 二抗，室温下孵育二十分钟后再以PBS 缓冲液冲洗三遍，最后通过DAB显色剂进行显色处理，室温下避光显色。通过光学显微镜进行观察，控制显色时间在3-5min，结束后蒸馏水冲洗终止显色。以苏木精复染、自来水冲洗返蓝、梯度酒精脱水、二甲苯透明后，以中性树胶封片，在镜下进行观察。
1.3 观察指标
由两名高年资、经验丰富的病理科医师对免疫组化切片结果进行双盲评价。当标本的细胞质、细胞膜上观察到黄至棕褐色颗粒时的情况记为阳性显色。然后结合阳性细胞百分比及其染色强度对病例阳性结果进行判断。当PD-L1、PD-1阳性细胞显示淡黄色的情况计1分，显示棕黄色的情况计2分，显示棕褐色的情况计3分。随机选取5个高倍视野，按视野中阳性细胞的平均百分比进行分级，10%以下计1分，10%-50%之间计2分，50%以上计3分。染色强度得分与阳性细胞百分比得分的乘积超过3分的情况记为阳性，3分以下的情况记为阴性[1]。
比较观察组和对照组标本中PD-L1、PD-1的阳性率。分析PD-L1、PD-1表达结果与患者病理特征（pTNM 分期、浸润情况、淋巴结转移情况等）、预后生存（5年生存率）之间的关系。
1.4 统计学方法
本次实验数据采用SPSS17.0软件进行统计学分析，采用卡方检验对计数资料进行分析，当结果显示P<0.05时认为结果有统计学差异。
2 结果
观察组标本中的PD-L1阳性率为61.0%（61/100），PD-1阳性率为34.0%（34/100），PD-L1阳性率明显更高。对照组标本中的PD-L1、PD-1阳性率均为0，且二者的表达结果之间无相关性。
在pTNM分期为Ⅰ-Ⅱ期、Ⅲ-Ⅳ期的患者中，PD-L1表达阳性率分别为52.5%（31/59）、73.2%（30/41），PD-1表達阳性率分别为35.6%（21/59）、31.7%（13/41）；在累及黏膜及黏膜下层、累及浆膜层、累及肌层的患者中，PD-L1表达阳性率分别为36.4%（8/22）、68.0%（17/25）、83.7%（36/43），PD-1表达阳性率分别为36.4%（8/22）、40.0%（10/25）、37.2%（16/43）；在合并淋巴结转移及不合并淋巴结转移的患者中，PD-L1表达阳性率分别为68.9%（31/45）、54.5%（30/55），PD-1表达阳性率分别为35.6%（16/45）、32.7%（18/55）。随着pTNM分期的升高，累及范围的增大，淋巴结转移的发生，PD-L1的阳性率不断升高，且不同亚组的比较有统计学差异，P<0.05；但PD-1的阳性率在各亚组组间比较无统计学差异（P>0.05）。见表1和表2、表3.
100例患者的5年生存率为83.0%，其中PD-L1阳性患者的生存率（73.8%（45/61））显著低于阴性患者生存率（97.4%（38/39）），PD-1阳性患者的生存率（55.9%（19/34））显著低于阴性患者生存率（97.0%（64/66）），比较均有统计学意义（P<0.05），PD-L1、PD-1的表达与患者的生存率呈负相关。见endprint
3 讨论
胃癌是十分常见的一种消化内科恶性肿瘤。现代人生化压力大、饮食不规律，加上环境污染等问题的愈发严重，胃癌的发生率呈现出不断上升的趋势[2]。尽管在现代外科医疗技术及放化疗等辅助治疗手段不断发展的情况下，胃癌的治疗效果得到极大的提升，但对于部分晚期、发生大面积转移的患者而言，其治疗效果并不十分理想，调查数据显示，其五年生存率尚不及25%。因而，对胃癌患者的临床病理特征及预后生存的相关分析预测指标进行研究十分必要。程序性死亡因子-1（PD- 1）和程序性死亡1- 配体（PD-L1）可以参与肿瘤抗原特异性细胞逃逸、细胞凋亡反应的过程，二者结合之后协同调节系统帮助肿瘤细胞逃避免疫杀伤[3-4]。
本文对PD-L1、PD-1在术区肿瘤组织、癌旁组织中的表达结果进行了比较，可见其在癌旁组织中的表达阳性率均为0，而在术区肿瘤组织中，PD-L1表达率为61.0%，且随pTNM分期的升高，累及范围的增大，淋巴结转移的发生呈现出不断升高的趋势，PD-L1阳性的情况下，生存率相对更低。其作为一种含蛋白磷酸化活化位点、疏水结构的氨基酸跨膜蛋白，在多种恶性肿瘤中都有过表达情况[4]，通过对其表达水平的测定，可以预测评价胃癌患者的病理变化及预后生存情况。而PD-1在胃癌组织中的阳性率为34.0%，相对PD-L1略低，其与患者的临床阳性特征之间无明显关系，但与患者的生存率呈负相关，作为一种负性共刺激信号分子，在肿瘤组织、淋巴细胞中多见，其可对患者的预后情况进行预测[5-6]
综上所述，通过胃癌组织中PD-L1、PD-1表达情况的分析，可以对患者的临床病理特征、预后情况进行预测。
参考文献
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