...巴坦复方制剂对产ESBLs大肠埃希菌持续效应的研究.pdf
符玉梅
【摘要】 目的 ：探讨体外抗产ESBLs大肠埃希菌中不同药性清热中药应用效果。方法：本次选取中药制成水煎剂原药共8味，具清热作用，用琼脂二倍稀释法实施体外抑制， ESBLs（+）大肠埃希菌、ESBLs（-）大肠埃希菌各22株，回顾对比临床资料。结果：8种即板蓝根、黄芩、金银花、黄连、大青叶、黄柏、连翘、知母中药单味水煎剂对22株产ESBLs大肠埃希菌临床朱均有程度不等的抑制作用，以连翘、黄连、黄芩效果较好。分析22株临床产酶大肠埃希菌应用不同药性清热药的MIC特点，统计对MIC50较小的话3味不同药性中药，即连翘、（x±s）值为（223.9±71.52），知母为（354.83±1.52），黄芩为（34.68±1.52），具统计学意义（P<0.05）。中药与西药呈无关作用。结论：中药中有对耐西药产ESBLs大肠埃希菌抗菌作用较好的单位中药，可在临床治疗中参与应用，具较高研究价值。
【关键词】 不同药性；清热中药；体外抗产ESBLs大肠埃希菌；效果研究
【中图分类号】R242 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2014）09
在自然界条件致病菌中，大肠埃希菌广泛存在，因三代头孢菌素在近年的普遍应用，在全球范围内，因大肠埃希菌产超广谱β-内酰酶（ESBLs）造成的多重耐药性均已是重要细菌耐药问题[1]。ESBLs可水解多数头孢菌素、青霉素等β-内酰胺类抗生素，由质粒介导，以传导、转化、结合等形式在同种属或不同种属间传递，引发暴发流行和严重医院感染，对β-内酰胺类药物在临床控制感染时的应用形成一定威胁[2]。细菌性感染采用中药治疗历史悠久，但在产ESBLs细菌引起的临床感染中应用，报道相对较少，故本次对不同药性的清热中药进行选取，分析体外抗ESBLs大肠埃希菌效果，为耐西药的产ESBLs大肠埃希菌的治疗提供方案，现总结如下。
1 材料与方法
1.1 仪器设备及器材
包括生物安全柜、手提式蒸汽消毒锅等。标准菌株：肺炎克苗柏菌ATCC700603，大肠埃希菌ATCC25922。实验菌株：采用双纸片增效试验（NCCLS推荐）行ESBLs检测，产ESBLs大肠埃希菌菌株来自门诊就诊的患者标本。ESBLs（+）大肠埃希菌、ESBLs（-）大肠埃希菌各22株。
1.2 方法
（1）水煎剂的制备与单味中药的选择：取板蓝根、黄芩、金银花、黄柏、大青叶、黄连、连翘、知母，称重，行磨碎处理，取10倍量水加入，行1-2h浸泡，微炎煮沸30min，实施过滤操作，对滤液进行留取。取10倍量水在药渣中加入，加热100°C，持续30min，再行过滤，合并两次滤液，蒸发至100g/100ml浓缩浓度，即原液，完成灭菌后保存备用。（2）制备菌悬液：对18-20h的纯菌行挑取培养，取无菌生理盐水调试，获得0.5麦氏比浊单位，为1.5×108CFC/ml含菌量，备用。取1.5×107CFU/ml菌悬液作试验用菌量。（3）测定药物最低抑菌浓度（MIC）：琼脂二倍稀释法，开展含药平板制备，取10只三角烧瓶，取融化的MH琼脂25ml分别加入，取100%（1：1）中药水煎液25ml在第一只中加入，浓度为0.5g/ml，予以混匀后，在其中取25ml，在第2只中加入，混匀在取25ml，在第3只中放入，依次稀释，使最终中药浓度为0.98g/L。倾注平板待用。（4）中西药物联合试验：庆大霉素、头孢噻肟、环丙沙星药敏纸片用无菌镊子紧贴于培养基平板表面（已接种细菌）。在距离药敏纸片12mm处用直径6mm的打孔器打孔，每个平板6个，孔内琼脂用无菌针头挑出，取中药原液50μl加入，35°C培养箱行18-20h培养。对MH琼脂平板培养基上对中药与西药联用效果进行观察。
1.3 统计学分析
统计学软件采用SPSS13.0版软件，组间计量数据采用（x±s）表示，计量资料行t检验，计数资料行X2检验，P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
分析22株临床产酶大肠埃希菌应用不同药性清热药的MIC特点，统计对MIC50较小的话3味不同药性中药，即连翘、（x±s）值为（223.9±71.52），知母为（354.83±1.52），黄芩为（34.68±1.52），具统计学意义（P<0.05）。中药与西药呈无关作用。MIC观察见表1。
3 讨论
ESBLs因种类、数量不断增加，易播散、作用底物广，且有较大个体差异，对临床治疗造成极大的影像，部分因产ESBLs诱发的感染，取抗生素治疗时甚至已无任何作用，故对其它途径药物进行选择，为临床研究的重点，中药以其独特的优势，已引起本领域重视[3-4]。
分析连翘、黄连、黄芩体外抗菌效果，采用中药抗菌，在我国已有悠久的应用历史，但在抗产酶中，针对单味中药的研究较少[5]。本次选取对产酶大肠埃希菌体外较为敏感的单味清热中药8位，且产ESBLs大肠埃希菌对其也较为敏感，结合表1示，连翘、黄连、黄芩有较强的抗菌作用，与因内相关报道一致[6-7]。采用中西医联合试验，耐西药产酶大肠埃希菌所耐西药采用中药无联合抗菌作用。对黄芩、连翘、黄连的抗菌机制进一步研究，依据产酶耐西药菌，就较强活性的中药制剂进行开发，具较重要的意义[8-9]。对药性不同的抑菌作用MIC50不同单味中药进行选择，即MIC50较小的清热泻火药知母、清热解毒药连翘、清热燥湿药黄芩行MIC均值统计，均具明显差异，表明抑菌效果在三种单味中药间有差异，可能为抑菌有效含量的不同和有效成分的不同所致。
综上，中药中有对耐西药产ESBLs大肠埃希菌抗菌作用较好的单位中药，可在临床治疗中参与应用，具较高研究价值。
参考文献
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