岳莉
[摘要] 意图 对青蒿琥脂片的溶出度查看进行办法学验证。办法 参照《我国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法对其溶出度进行查看[1]。选用紫外分光光度法，在289 nm的波利益测定吸光度，进行办法学验证。 成果 选用该办法测定青蒿琥脂片，别离在pH1.2、4.5、6.8、水四种溶出介质中，以浓度对吸收度进行线性回归，青蒿琥酯在10～60 μg/mL规模内浓度与吸收度呈杰出的线性关系。在以上四种溶出介质中的均匀回收率和规范偏差均契合要求。定论 本法测定青蒿琥酯片溶出量办法尚可，可用于该产品的质量操控。
[关键词] 青蒿琥脂片；溶出度测定；办法学验证
[中图分类号] R944 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）26-0067-04
青蒿琥酯是具有倍半萜结构的抗疟青蒿素的衍生物之一[1]，作为新式的抗疟药，青蒿琥酯具有高效、速效、低毒等特色，并且不易发作耐受性[2]。对原虫无性体有较强的杀灭效果，能敏捷操控疟疾发作，适用于脑型疟疾及各种危重疟疾的医治[3]。除抗疟外，尚有医治弓形虫病、抗肿瘤等效果[4]。青蒿琥酯片收载于世界药典第三版以及我国药典2010年版二部，溶出度测定作为反映或模仿体内药物吸收状况的试验办法在鉴定口服固体制剂的质量时有重要含义[5]。本文参阅有关相关文献对青蒿琥酯片的体外溶出试验进行了办法研讨[6，7]，可用于该产品拟定质量规范的参阅。
1仪器与试药
ZRS-8G智能溶出仪（天大天发科技有限公司）；T90+紫外分光光度计（PG.Instruments Ltd）；青蒿琥酯对照品（美国USP品牌，批号：100200-200202）；青蒿琥酯原料药（来历：武汉三洹医药化工有限公司）；青蒿琥酯片（来历：安徽新和成皖南药业有限公司）。所用试剂均为剖析纯，水为去离子水。
2溶出度测定的办法学验证[8]
2.1 衍生化办法的断定
参阅我国药典2010年版二部青蒿琥酯片溶出度测定办法。青蒿琥酯碱水解条件遭到水解温度、碱液浓度、水解时刻影响。因此，需求对其测定办法进行再验证与优化。精细称取青蒿琥酯原料药50 mg，加水溶解并制成1 000 mL，作为调查溶液。
2.1.1 水解温度调查 精细量取上述溶液20 mL，置25 mL量瓶中，加1M氢氧化钠溶液2.5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，共6份，别离置40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃水浴温度下保温45 min，取出，当即冷却至室温，另取相应试剂同法制成各自空白溶液。在200～400 nm的波长规模内进行紫外扫描，记载最大吸收波长及吸光度。成果：水解温度在50℃时吸光度改动最小，最大吸收波长为288 nm。参阅我国药典收载的青蒿琥酯片溶出度测定检测波长，断定检测波长为289 nm。
2.1.2 碱液浓度调查 精细量取上述溶液20 mL，置25 mL量瓶中，共6份，别离加0.5、1、2、3、4、5M氢氧化钠溶液2.5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，同置50℃水浴保温45 min，取出，当即冷却至室温，另取相应试剂同法制成各自空白溶液。在200～400 nm的波长规模内进行紫外扫描，记载最大吸收波长及吸光度。成果：碱液浓度在1M，水解液碱度在0.1M时吸光度最大，最大吸收波长在288 nm。
2.1.3 水解时刻调查 精细量取上述溶液20 mL，置25 mL量瓶中，加1M氢氧化钠溶液2.5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，共6份，同置50℃水浴保温，于15、30、45、60、75、90 min取出1份，当即冷却至室温，另取相应试剂同法制成各自空白溶液。在200～400 nm的波长规模内进行紫外扫描，记载最大吸收波长及吸光度。成果：水解时刻在45 min时吸光度最大，且最大吸收波长在289 nm左右。
2.1.4 测定溶液安稳性调查 精细量取上述溶液20 mL，置25 mL量瓶中，加1M氢氧化钠溶液2.5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，置50℃水浴保温45 min，取出，当即冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，并在试验环境下放置，在不一起刻测定吸光度。成果：在上述衍生化条件下的水解液在2 h内吸收值安稳，故应在水解后2 h内测定结束。
2.1.5 定论 依据上述序贯试验成果得出溶出量测定衍生化最佳办法为：精细量取上述溶液20 mL，置25 mL量瓶中，加1M氢氧化钠溶液2.5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，置50℃水浴保温45 min，取出，当即冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度。
2.2 体系适用性
此项内容首要对青蒿琥酯在pH1.2、4.5、6.8缓冲溶出介质（PhInt4）及水中的体系适用性进行验证。验证内容：检测波长、测定精细度、滤膜吸附性试验等。因为pH1.2缓冲液介质20 mL需求耗费1M氢氧化钠溶液1.5 mL，因此，为到达0.1M的水解液碱度，需参加1M氢氧化钠溶液4 mL。
2.2.1 检测波长断定 ①取供试品适量，精细称定分量，研细，精细称取相当于1片量的粉末，别离置1 000 mL pH1.2、4.5、6.8、水四种介质中，置37℃保温桨法100 r/min拌和1 h，取溶液经0.8 μm微孔滤膜滤过，精细量取滤液20 mL，置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液2.5 mL（pH1.2缓冲液参加4 mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。②取青蒿琥酯对照品10 mg，置250 mL量瓶中，别离加pH1.2、4.5、6.8、水四种溶出介质200 mL，超声使溶解，加1 mol/L氢氧化钠溶液25 mL（pH1.2缓冲液参加40 mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。③取缺青蒿琥酯阴性粉末230 mg，别离置1 000 mL pH1.2、4.5、6.8、水四种介质中，置37℃保温桨法100 r/min拌和1 h，取溶液经滤膜滤过，精细量取滤液20 mL，置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液2.5 mL（pH1.2缓冲液参加4mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为阴性对照溶液。④取供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液同置（50±1）℃水浴中保温45 min，敏捷冷却至室温，在200～400 nm的波长规模进行扫描。⑤成果表明：在pH 1.2、4.5、6.8、水四种溶出介质中，供试品溶液与对照品溶液最大吸收波长均为289 nm，阴性对照溶液在此波长下均无吸收。因此，断定检测波长为289 nm。endprint
2.2.3 滤膜吸附性试验 取不经滤膜过滤的溶出液，再取适量，经滤膜过滤，将此次过滤前后的溶出液照上述溶出量测定办法测定其吸光度，过滤前后吸光度差值应小于1%。成果表明：滤膜对被测组分有必定程度的吸附。
2.3 专特色
取上述供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，在289 nm的检测波长下别离测定吸光度。成果表明：阴性对照溶液在此波长下无吸收，阐明处方辅料不搅扰本法的测定；阴性样品在水、pH1.2、pH4.5三种介质中的搅扰率大于2%，有必定程度的搅扰。此法有待进一步的进步。
2.4 线性
2.4.1办法 ①pH1.2缓冲液： 取青蒿琥酯对照品25 mg，精细称定，置250 mL量瓶中，加pH1.2缓冲液适量超声处理10 min，并稀释至刻度，摇匀。精细量取5、10、15、20、25、30 mL，别离置50 mL量瓶中，加上述介质稀释至刻度，摇匀，作为各对照品溶液。精细量取各对照品溶液20 mL，别离置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，同置（50±1）℃水浴中保温45 min，敏捷冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=0.0036X-0.0003（日内）、r=0.9988，Y=0.0029X+0.0101（日间）、r=0.9984。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0028X-0.0006（日内）、r=0.9960，Y=0.0020X-0.0059（日间）、r=0.9940。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0037X+0.0044（日内）、r=0.99998，Y=0.0036X+0.0014（日间）、r=0.9995。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0036X-0.0050（日内）、r=0.9990，Y=0.0028X-0.0005（日间）、r=0.9990。
2.4.2 规模 成果显现：青蒿琥酯在（10～60）μg/mL（相当于标明浓度的20%～120%）的浓度规模内，办法的线性杰出。因此，断定本法的线性规模为20%～120%。
2.5 精确度（回收率）
2.5.1办法 ① pH1.2缓冲液：取缺青蒿琥酯阴性230 mg，置1 000 mL量瓶中，共9份，别离精细称取青蒿琥酯作业对照品30 mg、40 mg、50 mg，各3份，别离置上述量瓶中，加相应溶出介质适量超声处理10 min，并稀释至刻度，经0.8 μm微孔滤膜滤过，精细量取续滤液20 mL，置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取青蒿琥酯对照品10 mg，置250 mL量瓶中，加上述介质200 mL，加1 mol/L氢氧化钠溶液40 mL（以下的溶出介质参加25 mL）振摇使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液，同置50℃水浴保温45 min，当即冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，核算测得量。依据测得量与参加量比值核算本法回收率。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定。
3评论
因为青蒿琥酯化学结构中仅琥珀酸基团含有生色团，其最大吸收波长在216 nm左右，但吸收系数很小，需求较高的测定浓度，超过了溶出度测定的浓度要求（50 mg→1000 mL，50 μg/mL），但遇稀碱后结构发作定量转化，其产品在289 nm 处有一强吸收峰，紫外分光光度法就是使用青蒿琥酯这一性质树立的定量剖析办法。选用高效液相色谱法测定溶液的浓度要在4 mg/mL左右，若进行溶出量测定，需将体系灵敏度增强80倍，必然形成基线噪音增强，测定的精确度下降。因此，选用衍生化的办法，经过碱水解生成助色基团，使吸收峰红移，吸收系数添加，到达紫外分光光度法测定要求。
青蒿素类化合物难溶于水、稀酸、稀碱、表面活性剂，易溶于非极性有机溶剂，但固体制剂在上述溶剂中难以崩解，更谈不上溶出。关于难溶于水的药物，一般不选用有机溶剂用于溶出度测定[10，11]。因为青蒿琥酯较差的溶解性，现在市场上相应的剂型较少，别的青蒿琥酯具有诱导肝药酶的效果，首过效应显着，且在体内代谢快，导致用药次数频频；若能经过改动剂型，使其在体内缓释，进步药物的生物有用使费用，则能战胜上述缺陷，到达更有用医治的意图。笔者参照我国药典2010年版二部青蒿琥酯片溶出度测定办法，选用紫外分光光度法进行溶出量定量，成果可行并契合国家药品规范。此办法研讨丰厚和完善了我国药典的质量规范，并对我国药典所载办法的修订有学习含义。
本法测定青蒿琥酯片溶出量办法尚可，但因为不同试验人员操作，其成果的精确度与精细度均不行杰出。试验过程中发现，在衍生反响中要严格操控反响温度在50℃，参加1 mol/L氢氧化钠溶液的量也要依据样品中的详细含量探索出最佳的参加量，否则会影响测定成果的精确性。别的青蒿琥酯安稳性较差，在受热时可水解为双氢青蒿素。一起，其在体内的代谢活性产品为双氢青蒿素，因此，青蒿琥酯需在避光阴凉处保存。这种将青蒿琥酯衍生化后直接测定其含量的办法，操作烦琐， 灵敏度较低，精确度和精细度不高，故现在青蒿工业面对的问题之一是赶快树立简洁、精确的青蒿素含量测定办法。因此，咱们针对此法还需进一步的进步。参阅文献发现，青蒿素的测定办法较多，因为此法为我国药典所收载，因此咱们现在仍挑选该法进行溶出量的测定。
[参阅文献]
[1] 我国药典委员会. 我国药典二部[S]. 北京：我国医药科技出版社，2010：421-422.
[2] 黄兰芷，赵志强，衡林森，等. 青蒿琥酯缓释固体分散体的制备及体外溶出度研讨[J]. 中成药，2010，32（10）：1702-1704.
[3] 张晓红. 青蒿素类药物抗肿瘤效果机制研讨概略[J]. 中医学报，2014，29（188）：15-16.
[4] 王文清，林蒙，王琳芝，等. 青蒿琥酯纳米脂质体抗肿瘤效果的特色[J]. 时珍国医国药，2013，24（6）：1533-1534.
[5] 詹利之，江武城，林燕芳，等. 青蒿素类复方制剂溶出度的研讨[J].中药材，2012，35（12）：2033-2036.
[6] 黄君丽，詹利之，林燕芳，等. UV法测定青蒿琥酯软胶囊中青蒿琥酯的含量[J]. 中药材，2012，35（10）：1693-1695.
[7] 王文清，林蒙，王琳芝，等. 双氢青蒿素片溶出度的测定办法[J]. 我国医院药学杂志，2011，31（19）：1605-1608.
[8] 殷果，李惠义，闫研，等. HPLC法测定青蒿素哌喹片中青蒿素的溶出度[J]. 药物剖析杂志，2014，34（2）：368-371.
[9] 张楠. 青蒿素类药物的首要研讨进展[J]. 药物研讨，2013，30（1）：13-16.
[10] 王满元，张东，李朝霞，等. 北京产黄花蒿中青蒿酸的含量测定与定向别离[J]. 我国试验方剂学杂志，2014， 20（6）：48-51.
[11] 梁晓媛，李隆云，白志川. 青蒿中青蒿素提取工艺研讨进展[J]. 重庆理工大学学报，2013， 27（2）：32-38.
（收稿日期：2014-04-09）endprint
2.2.3 滤膜吸附性试验 取不经滤膜过滤的溶出液，再取适量，经滤膜过滤，将此次过滤前后的溶出液照上述溶出量测定办法测定其吸光度，过滤前后吸光度差值应小于1%。成果表明：滤膜对被测组分有必定程度的吸附。
2.3 专特色
取上述供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，在289 nm的检测波长下别离测定吸光度。成果表明：阴性对照溶液在此波长下无吸收，阐明处方辅料不搅扰本法的测定；阴性样品在水、pH1.2、pH4.5三种介质中的搅扰率大于2%，有必定程度的搅扰。此法有待进一步的进步。
2.4 线性
2.4.1办法 ①pH1.2缓冲液： 取青蒿琥酯对照品25 mg，精细称定，置250 mL量瓶中，加pH1.2缓冲液适量超声处理10 min，并稀释至刻度，摇匀。精细量取5、10、15、20、25、30 mL，别离置50 mL量瓶中，加上述介质稀释至刻度，摇匀，作为各对照品溶液。精细量取各对照品溶液20 mL，别离置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，同置（50±1）℃水浴中保温45 min，敏捷冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=0.0036X-0.0003（日内）、r=0.9988，Y=0.0029X+0.0101（日间）、r=0.9984。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0028X-0.0006（日内）、r=0.9960，Y=0.0020X-0.0059（日间）、r=0.9940。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0037X+0.0044（日内）、r=0.99998，Y=0.0036X+0.0014（日间）、r=0.9995。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0036X-0.0050（日内）、r=0.9990，Y=0.0028X-0.0005（日间）、r=0.9990。
2.4.2 规模 成果显现：青蒿琥酯在（10～60）μg/mL（相当于标明浓度的20%～120%）的浓度规模内，办法的线性杰出。因此，断定本法的线性规模为20%～120%。
2.5 精确度（回收率）
2.5.1办法 ① pH1.2缓冲液：取缺青蒿琥酯阴性230 mg，置1 000 mL量瓶中，共9份，别离精细称取青蒿琥酯作业对照品30 mg、40 mg、50 mg，各3份，别离置上述量瓶中，加相应溶出介质适量超声处理10 min，并稀释至刻度，经0.8 μm微孔滤膜滤过，精细量取续滤液20 mL，置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取青蒿琥酯对照品10 mg，置250 mL量瓶中，加上述介质200 mL，加1 mol/L氢氧化钠溶液40 mL（以下的溶出介质参加25 mL）振摇使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液，同置50℃水浴保温45 min，当即冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，核算测得量。依据测得量与参加量比值核算本法回收率。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定。
3评论
因为青蒿琥酯化学结构中仅琥珀酸基团含有生色团，其最大吸收波长在216 nm左右，但吸收系数很小，需求较高的测定浓度，超过了溶出度测定的浓度要求（50 mg→1000 mL，50 μg/mL），但遇稀碱后结构发作定量转化，其产品在289 nm 处有一强吸收峰，紫外分光光度法就是使用青蒿琥酯这一性质树立的定量剖析办法。选用高效液相色谱法测定溶液的浓度要在4 mg/mL左右，若进行溶出量测定，需将体系灵敏度增强80倍，必然形成基线噪音增强，测定的精确度下降。因此，选用衍生化的办法，经过碱水解生成助色基团，使吸收峰红移，吸收系数添加，到达紫外分光光度法测定要求。
青蒿素类化合物难溶于水、稀酸、稀碱、表面活性剂，易溶于非极性有机溶剂，但固体制剂在上述溶剂中难以崩解，更谈不上溶出。关于难溶于水的药物，一般不选用有机溶剂用于溶出度测定[10，11]。因为青蒿琥酯较差的溶解性，现在市场上相应的剂型较少，别的青蒿琥酯具有诱导肝药酶的效果，首过效应显着，且在体内代谢快，导致用药次数频频；若能经过改动剂型，使其在体内缓释，进步药物的生物有用使费用，则能战胜上述缺陷，到达更有用医治的意图。笔者参照我国药典2010年版二部青蒿琥酯片溶出度测定办法，选用紫外分光光度法进行溶出量定量，成果可行并契合国家药品规范。此办法研讨丰厚和完善了我国药典的质量规范，并对我国药典所载办法的修订有学习含义。
本法测定青蒿琥酯片溶出量办法尚可，但因为不同试验人员操作，其成果的精确度与精细度均不行杰出。试验过程中发现，在衍生反响中要严格操控反响温度在50℃，参加1 mol/L氢氧化钠溶液的量也要依据样品中的详细含量探索出最佳的参加量，否则会影响测定成果的精确性。别的青蒿琥酯安稳性较差，在受热时可水解为双氢青蒿素。一起，其在体内的代谢活性产品为双氢青蒿素，因此，青蒿琥酯需在避光阴凉处保存。这种将青蒿琥酯衍生化后直接测定其含量的办法，操作烦琐， 灵敏度较低，精确度和精细度不高，故现在青蒿工业面对的问题之一是赶快树立简洁、精确的青蒿素含量测定办法。因此，咱们针对此法还需进一步的进步。参阅文献发现，青蒿素的测定办法较多，因为此法为我国药典所收载，因此咱们现在仍挑选该法进行溶出量的测定。
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[4] 王文清，林蒙，王琳芝，等. 青蒿琥酯纳米脂质体抗肿瘤效果的特色[J]. 时珍国医国药，2013，24（6）：1533-1534.
[5] 詹利之，江武城，林燕芳，等. 青蒿素类复方制剂溶出度的研讨[J].中药材，2012，35（12）：2033-2036.
[6] 黄君丽，詹利之，林燕芳，等. UV法测定青蒿琥酯软胶囊中青蒿琥酯的含量[J]. 中药材，2012，35（10）：1693-1695.
[7] 王文清，林蒙，王琳芝，等. 双氢青蒿素片溶出度的测定办法[J]. 我国医院药学杂志，2011，31（19）：1605-1608.
[8] 殷果，李惠义，闫研，等. HPLC法测定青蒿素哌喹片中青蒿素的溶出度[J]. 药物剖析杂志，2014，34（2）：368-371.
[9] 张楠. 青蒿素类药物的首要研讨进展[J]. 药物研讨，2013，30（1）：13-16.
[10] 王满元，张东，李朝霞，等. 北京产黄花蒿中青蒿酸的含量测定与定向别离[J]. 我国试验方剂学杂志，2014， 20（6）：48-51.
[11] 梁晓媛，李隆云，白志川. 青蒿中青蒿素提取工艺研讨进展[J]. 重庆理工大学学报，2013， 27（2）：32-38.
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2.2.3 滤膜吸附性试验 取不经滤膜过滤的溶出液，再取适量，经滤膜过滤，将此次过滤前后的溶出液照上述溶出量测定办法测定其吸光度，过滤前后吸光度差值应小于1%。成果表明：滤膜对被测组分有必定程度的吸附。
2.3 专特色
取上述供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，在289 nm的检测波长下别离测定吸光度。成果表明：阴性对照溶液在此波长下无吸收，阐明处方辅料不搅扰本法的测定；阴性样品在水、pH1.2、pH4.5三种介质中的搅扰率大于2%，有必定程度的搅扰。此法有待进一步的进步。
2.4 线性
2.4.1办法 ①pH1.2缓冲液： 取青蒿琥酯对照品25 mg，精细称定，置250 mL量瓶中，加pH1.2缓冲液适量超声处理10 min，并稀释至刻度，摇匀。精细量取5、10、15、20、25、30 mL，别离置50 mL量瓶中，加上述介质稀释至刻度，摇匀，作为各对照品溶液。精细量取各对照品溶液20 mL，别离置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，同置（50±1）℃水浴中保温45 min，敏捷冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=0.0036X-0.0003（日内）、r=0.9988，Y=0.0029X+0.0101（日间）、r=0.9984。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0028X-0.0006（日内）、r=0.9960，Y=0.0020X-0.0059（日间）、r=0.9940。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0037X+0.0044（日内）、r=0.99998，Y=0.0036X+0.0014（日间）、r=0.9995。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定，得回归方程Y=0.0036X-0.0050（日内）、r=0.9990，Y=0.0028X-0.0005（日间）、r=0.9990。
2.4.2 规模 成果显现：青蒿琥酯在（10～60）μg/mL（相当于标明浓度的20%～120%）的浓度规模内，办法的线性杰出。因此，断定本法的线性规模为20%～120%。
2.5 精确度（回收率）
2.5.1办法 ① pH1.2缓冲液：取缺青蒿琥酯阴性230 mg，置1 000 mL量瓶中，共9份，别离精细称取青蒿琥酯作业对照品30 mg、40 mg、50 mg，各3份，别离置上述量瓶中，加相应溶出介质适量超声处理10 min，并稀释至刻度，经0.8 μm微孔滤膜滤过，精细量取续滤液20 mL，置25 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL（以下的溶出介质参加2.5 mL），加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取青蒿琥酯对照品10 mg，置250 mL量瓶中，加上述介质200 mL，加1 mol/L氢氧化钠溶液40 mL（以下的溶出介质参加25 mL）振摇使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液，同置50℃水浴保温45 min，当即冷却至室温，在289 nm的波利益测定吸光度，核算测得量。依据测得量与参加量比值核算本法回收率。②pH4.5缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。③pH6.8缓冲液：同pH1.2缓冲液项下制造测定。④水：同pH1.2缓冲液项下制造测定。
3评论
因为青蒿琥酯化学结构中仅琥珀酸基团含有生色团，其最大吸收波长在216 nm左右，但吸收系数很小，需求较高的测定浓度，超过了溶出度测定的浓度要求（50 mg→1000 mL，50 μg/mL），但遇稀碱后结构发作定量转化，其产品在289 nm 处有一强吸收峰，紫外分光光度法就是使用青蒿琥酯这一性质树立的定量剖析办法。选用高效液相色谱法测定溶液的浓度要在4 mg/mL左右，若进行溶出量测定，需将体系灵敏度增强80倍，必然形成基线噪音增强，测定的精确度下降。因此，选用衍生化的办法，经过碱水解生成助色基团，使吸收峰红移，吸收系数添加，到达紫外分光光度法测定要求。
青蒿素类化合物难溶于水、稀酸、稀碱、表面活性剂，易溶于非极性有机溶剂，但固体制剂在上述溶剂中难以崩解，更谈不上溶出。关于难溶于水的药物，一般不选用有机溶剂用于溶出度测定[10，11]。因为青蒿琥酯较差的溶解性，现在市场上相应的剂型较少，别的青蒿琥酯具有诱导肝药酶的效果，首过效应显着，且在体内代谢快，导致用药次数频频；若能经过改动剂型，使其在体内缓释，进步药物的生物有用使费用，则能战胜上述缺陷，到达更有用医治的意图。笔者参照我国药典2010年版二部青蒿琥酯片溶出度测定办法，选用紫外分光光度法进行溶出量定量，成果可行并契合国家药品规范。此办法研讨丰厚和完善了我国药典的质量规范，并对我国药典所载办法的修订有学习含义。
本法测定青蒿琥酯片溶出量办法尚可，但因为不同试验人员操作，其成果的精确度与精细度均不行杰出。试验过程中发现，在衍生反响中要严格操控反响温度在50℃，参加1 mol/L氢氧化钠溶液的量也要依据样品中的详细含量探索出最佳的参加量，否则会影响测定成果的精确性。别的青蒿琥酯安稳性较差，在受热时可水解为双氢青蒿素。一起，其在体内的代谢活性产品为双氢青蒿素，因此，青蒿琥酯需在避光阴凉处保存。这种将青蒿琥酯衍生化后直接测定其含量的办法，操作烦琐， 灵敏度较低，精确度和精细度不高，故现在青蒿工业面对的问题之一是赶快树立简洁、精确的青蒿素含量测定办法。因此，咱们针对此法还需进一步的进步。参阅文献发现，青蒿素的测定办法较多，因为此法为我国药典所收载，因此咱们现在仍挑选该法进行溶出量的测定。
[参阅文献]
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（收稿日期：2014-04-09）endprint
