周佳磊++徐冬新++李仪++陈志敏
[摘要] 意图 调查不同程度小儿肺炎时，血清致炎性因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、肺外表活性蛋白A（SP-A）表达含量的改变及其临床含义。办法 将195例肺炎儿童依据病况严峻程度将其分为一般肺炎患儿及重症肺炎患儿，别的挑选65例非肺炎患儿作为对照组，选用ELISA办法检测不同程度肺炎血清中的TNF-α和 SP-A 水平。 成果 TNF-α、SP-A在一般、重症肺炎患儿血清中表达水平显着升高，且重症肺炎组的TNF-α、SP-A表达水平显着高于一般肺炎组。定论 在小儿重症肺炎患儿发病进程中，血清中肿瘤坏死因子TNF-α和肺外表活性蛋白SP-A 的表达水平显着增多，能够反映肺危害程度，可作为临床检测目标。
[关键词] 儿童肺炎；TNF-α；肺外表活性蛋白A（SP-A）；血清
[中图分类号] R725.6[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2014）18-0145-03
TNFα， SP-A expression and clinical significance of varying degrees of pneumonia in children
ZHOU Jialei1 XU Dongxin1 LI Yi1 CHEN Zhimin2
1.Laboratory，Medicine of First Peoples Hospital in Xiaoshan District of Hangzhou City，Hangzhou 311200，China； 2.Respiratory Department of Childrens Hospital of Zhejiang University，Hangzhou 310003，China
[Abstract] Objective To observe the expression levels change and its clinical significance of TNF-α， SP-A in children with varying degrees of pneumonia. Methods A total 195 cases of pneumonia children patients were divided into ordinary pneumonia and severe pneumonia patients， another 65 cases of non-pneumonic children patients as the control group， ELISA assay was used to detect serum TNF-α and SP-A level. Results The levels of serum SP-A and TNF-α ofpneumonia children group were higher than the control groups， and severe pneumonia patients were higher than ordinary pneumonia. Conclusion The expression level of TNF-α and SP-A increased significant in the pathogenesis of children with severe pneumonia which could reflect the degree of lung injury and as a indicator in clinical testing.
[Key words] Child pneumonia； TNF-α； SP-A； Serum
小儿肺炎是儿童中最常见一种呼吸道疾病，居小儿常见疾病首位，四季均简单发作，3岁以下的婴幼儿常在春季和冬天患病；其临床表现多为咳嗽、发热、气促、呼吸困难或肺部啰音，如医治不完全，简单重复发作，引起不同类型的重症并发症，病况重者死亡率较高[1]。小儿肺炎的发作一方面与细菌、病毒的侵染有关，构成肺部危害，另一方面与机体的过度防御反响有关，且一些细胞炎性因子如肿瘤坏死因子（TNF-α）会显着添加[2]。肺外表活性蛋白A（SP-A）对保持肺泡的结构及正常功用有着非常重要的效果，与多种肺部疾病密切相关[3]，且当疾病引起肺部危害的时分，肺安排内的SP-A可进入血液循环。本研讨经过检测不同程度肺炎患儿血清中TNF-α及SP-A表达水平，评论其对诊治小儿肺炎的临床辅导含义，现报导如下。
1 材料与办法
1.1 临床材料
挑选我院自2011年3月～2012年4月收治的195例肺炎儿童患儿，一般肺炎和重症肺炎依照或参照“小儿四病防治计划和小儿肺炎防治计划”确诊规范界说，并扫除既往有心肺疾病患儿；其间重症肺炎患儿组90例，男59例，女31例，年纪1～3岁，均匀（2.85±0.71）岁，病程7～20 d，均匀（9.62±4.34） d；一般肺炎患儿组105例，男85例，女20例，年纪1～5岁，均匀（2.91±2.63）岁，病程3～15 d，均匀（5.79±3.38） d；同期挑选本院无肺炎的65例儿童作为对照组，其间男34例，女31例，年纪13个月～4岁，均匀（3.02±1.65）岁。本研讨经医院道德委员会赞同赞同，一切患儿家长均自愿参加本研讨，并签署知情赞同书。三组患儿的性别构成、年纪散布、病程等一般材料比较，差异均无计算学含义（P>0.05），具有可比性。
1.2 办法
在入院确诊后三组患儿在医治前抽取静脉血4 mL，然后室温下放置1 h，之后以3000 r/min离心速率离心20 min，弃去沉积取上清液，置于20℃冰箱保存以待检测TNF-α和SP-A的表达水平。TNF-α的测定依据酶联免疫吸附法原理，选用购自我国医学科学院的试剂盒测定；相同，选用ELISA法测定血清SP-A水平，该试剂盒购自美国 RD 公司。测定的原理是在酶标仪下检测450 nm波长下各孔的吸光度值（OD 值） ，依据吸光值的巨细和相关曲线方程剖析反响样品中TNF-α和SP-A浓度。endprint
1.3 计算学办法
选用SPSS15.0计算软件进行剖析，计量材料以（x±s）标明，多组比较选用方差剖析，组间比较选用t查验，P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
TNFα、SP-A在一般、重症肺炎患儿血清中表达水平显着升高（一般肺炎组：tTNFα=4.81，tSP-A=3.20，P<0.05；重症肺炎组：tTNFα=9.52，tSP-A=5.63，P<0.01），且重症肺炎组的TNFα、SP-A表达水平显着高于一般肺炎组（tTNFα=4.68，tSP-A=3.26，P<0.05），见表1。
表1 不同程度肺炎血清TNF-α、SP-A检测（x±s，ng/L）
注：与对照组比较，a P<0.05，b P<0.01；重症肺炎组与一般肺炎组比较，c P<0.05
3 评论
肺炎是小儿常发的肺部部分炎症，除了感染病原菌效果外，机体的细胞免疫反响性在肺炎发作中也发挥重要效果。现在现已了解到，重症肺炎的发作与病原体感染后过激的炎症反响相关，由肺部部分炎症开展成为全身性炎症。关于肺炎衣原体（Cpn）感染所造成的的急性呼吸道感染、肺炎及其相关性疾病研讨标明，感染Cpn后机体多呈缓慢经过，不只诱发以Th1型细胞免疫反响为主的特异性免疫，一起体液免疫及有ToⅡ样受体参加的非特异性免疫也在病原菌的铲除进程中发挥了重要的辅佐效果。基于此，在本研讨中选用常用的血清TNF-α和SP-A作为炎症免疫性反响的客观点评目标。
TNF-α是一种广泛存在于肺泡安排细胞中的肿瘤坏死因子[4]，能够杀死肿瘤坏死细胞，在肺炎发作时很多表达杀死被损坏的非正常细胞，可诱导其他炎症因子的开释，是免疫调停中的重要因子，由巨噬细胞和中性粒细胞发作。可介导多种炎症的生理反响，如部分免疫、器官危害、体系危害，在炎性细胞因子中TNF-α是感染后机体最早发作的细胞因子之一，促进B细胞增殖、诱发多种细胞因子网络的发作，能够危害毛细血管内皮细胞，添加肺部毛细血管的通透性，很多细胞内容物外泄发作炎症反响[5]。尽管TNF-α因子是机体铲除病原体必需的，可是过度的开释会引起安排危害[6]。在本院测定的65例重症肺炎和一般肺炎组小儿患者的TNF-α水平比非肺炎对照组显着增高，标明TNF-α可能参加了肺炎炎症反响的进程， 估测可能是因为TNF-α水平的显着升高经过一系列级联反响，终究导致患儿肺的危害；且TNF-α含量多少可能反映了肺危害程度，二者之间具有必定的相关性，因此能够作为临床检测目标之一。
SP-A是肺外表含量最多的一种糖蛋白[7]，最早在肺泡Ⅱ型上皮细胞中被发现，其表达量多、信号丰厚，参加肺外表活性生物膜的构成和代谢。SP-A能够和二棕榈酰卵磷脂结合构成肺外表PS（一种脂蛋白复合物）成分[8]，PS能够削减肺泡萎缩等肺病，其间SP-A是PS最重要的成分，对安稳PS含义严峻[9]。SP-A 在肺内表达量丰厚，肺外及其他器官安排表达量低，具有调理肺部分免疫和炎症反响的效果[10]，其生物学特性和功用杂乱。当儿童机体无肺炎病症时肺泡和周围的毛细血管能够阻挠SP-A经过屏障进入血液循环，可是当机体肺部发作炎症肺部危害时，SP-A经过肺泡和毛细血管屏障进入到血液循环，成为肺危害的标志性血清学查验目标[11]。SP-A跟着病况的加剧不只肺泡中的含量削减，血清中的含量也会逐步削减，可是在必定危害程度的范围内，肺部危害程度与血清中SP-A 水平成正比，血清SP-A是反映肺功用障碍牢靠的目标[12]。体外检测血清中SP-A水平，取样简单易行，减轻患儿的苦楚，成果具有显着特异性，有利于辅导临床医治[13]。
本文经过对重症、一般肺炎患儿以及非肺炎患儿的比较标明，TNF-α在重症、一般肺炎患儿血清中表达水平升高，提示当炎症反响反常活泼，致炎性细胞因子TNF-α过度开释是向重症肺炎开展的痕迹[14]；TNF-α引发炎症反响使肺泡和周围毛细血管通透性添加，SP-A从肺泡渗漏到血液，血清内SP-A水平升高而肺泡内SP-A水平下降。在患儿不同程度的肺炎中，TNF-α和肺外表活性蛋白SP-A 表达水平不同，在一般肺炎患儿中两者的表达水均匀在必定程度增高；在儿童重症肺炎血清中肿瘤坏死因子TNF-α和肺外表活性蛋白SP-A 的表达水平显着高于一般组和非肺炎患儿组。这与相似文献研讨的成果是根本共同的，如李颖[3]等选取重症肺炎患儿20例、一般肺炎患儿25例以及择期手术的非肺炎患儿14例，别离于医治前使用ELISA定量法检测各组患儿的血清SP-A水平，研讨成果标明重症肺炎及一般肺炎组患儿血清SP-A水均匀高于择期手术的非肺炎患儿的水平。进一步的相关性研讨标明，重症肺炎组和一般肺炎组患儿血清SP-A水平与其动脉血氧分压（PaO2）呈显着负相关，进而以为血清SP-A水平能有用反映儿童肺炎后肺危害的严峻程度，有利于进一步辅导临床医治，关于儿童肺炎预后的判别亦具有必定临床含义。在本研讨中，仅选取了血清TNF-α和SP-A作为炎症免疫性反响的客观点评目标，在肺炎的发作开展进程中可能有其他较多的细胞因子和免疫炎症介质也参加其间，如白细胞介素宗族、α-干扰素（α-INF）以及CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群等，因为道德学所限及其他要素的原因，本研讨未归入其他可能更具有含义的客观性点评目标，是本研讨的不足之处。一起本研讨未对肺炎患儿血清TNF-α与SP-A的相关性进行剖析，二者之间是否具有相关性亦未可知，也是本研讨的不足之处。
综上所述，可见肺炎患儿血清TNF-α与SP-A水平较高，且跟着疾病严峻程度的添加，二者水平亦随之增高，标明血清TNF-α与SP-A可能参加了患儿肺危害的病理发作开展进程，在必定程度上反映了患儿肺危害的程度，可作为临床确诊和预后评价的检测目标之一。
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（收稿日期：2013-12-17）endprint
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