林婷+廖斌
[摘要]白血病细胞对化疗药物发生多药耐药（MDR）是化疗失利和疾病复发的首要原因。因为肿瘤细胞MDR效果机制十分杂乱，而中药可多靶点、多途径、低毒、高效反转MDR。作为耐药反转剂，中药增强耐药肿瘤细胞对化疗药物灵敏性成为研讨热门。本文就肿瘤细胞MDR杂乱机制、中药单体和中药复方反转MDR的研讨进行总述。
[关键词]中药单体；中药复方；白血病细胞；多药耐药
[中图分类号] R733.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）08（c）-0011-04
[Abstract]The main reason of causing failure of chemotherapy and disease recurrence is multidrug resistance （MDR）.Because the mechanism of tumor cell MDR action is very complex，traditional Chinese medicine can reverse MDR with multiple targets，multiple pathways，low toxicity and high efficiency.As a drug resistance reversal agent，traditional Chinese medicine has become a hot topic that it enhances the sensitivity of drug-resistant tumor cells to chemotherapeutic drugs.This article reviews the research of the complex mechanism of tumor cell MDR and the reversal of MDR by single traditional Chinese medicine and compound traditional Chinese medicine.
[Key words]Single traditional Chinese medicine；Compound traditional Chinese medicine；Leukemia cell；Multidrug resistance
多药耐药（multidrug resistance，MDR）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物发生耐药性的一起，对未触摸过和触摸过、不同效果机制、不同效果靶点的抗肿瘤药物发生MDR的现象[1]。肿瘤细胞发生MDR与外排泵ABC转运蛋白的过度表達、DNA修正机制活性增强、细胞内酶反常改动、细胞凋亡水平的反常、器官微环境改动有亲近联系[2]。这些效果机制独自或许一起效果诱导肿瘤细胞对化疗药物发生耐药性，因而寻觅有用的反转剂进步肿瘤患者生存率成为当时研讨者的热门。白血病细胞的MDR是化疗失利和疾病复发的首要原因之一。中药因多靶点、低毒性等长处在反转白血病细胞的MDR获得重要效果，本文将对近几年研讨中药反转白血病细胞的MDR进行总述。
1肿瘤细胞的MDR机制
构成肿瘤细胞的MDR机制首要包含以下几个方面。①外排泵ABC转运蛋白过度表达：人类基因组中现已被判定ABC转运蛋白有49种，分为7个亚宗族，其间P糖蛋白（P-gp/MDR1/ABCB1）、MDR相关蛋白（MRP1/ABCC1）和乳腺癌耐药相关蛋白（BCRP/MXR/ABCG2）三种ABC转运蛋白过量表达与肿瘤细胞MDR的联系最亲近。过度表达的ABC转运蛋白将外源性物质如抗癌药物转运出细胞外，下降细胞内药物浓度，下降肿瘤细胞对立癌药物灵敏性致MDR[3]。②细胞凋亡水平的反常改动：当肿瘤细胞内因为遗传要素或化疗药物等外源要素的诱导，引起凋亡通路中的抗凋亡蛋白过量表达、促凋亡因子低表达或失活以及存活信号通路活性增强。凋亡通路中的这些反常改动独自或一起效果，使得肿瘤细胞凋亡受阻，对多种化疗药物诱导的凋亡不灵敏，表现为MDR。促凋亡因子如Caspase宗族、Bax、Bid、TNF等表达下降，抗凋亡因子如Bcl-2、凋亡按捺蛋白（inhibitor apoptosis protein，IAP）宗族、NF-κB等表达添加，Fas-FasL表达水平反常均可引起肿瘤细胞MDR[4]。③细胞内酶的反常改动：DNA拓扑异构酶Ⅱ（DNA topoisomerase Ⅱ，TOPOⅡ）活性增强、谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase，GST）活性增强、PKCα表达上调等的改动，使抗癌药物的靶点削减或损失，发生耐药[5-6]。④信号通路的反常激活：进一步研讨发现，肿瘤细胞还经过PI3K/Akt信号通路增强ABC转运蛋白表达，尤其是增强P-gp表达导致细胞MDR[7]。⑤microRNA调控：microRNA经过靶mRNA的3′-UTR碱基互补配对诱导mRNA降解或按捺蛋白组成，对意图基因表达进行负性调控。当microRNA如miR-424、miR-454、miR-181a、miR-1307等调控P-gp/MDR1、PI3K/Akt、Bcl-2失常可减低肿瘤细胞对化疗药物的灵敏性引起MDR[8]。⑥其他机制：细胞微环境改动、药物成分改动等均可能引起细胞MDR。
许多研讨发现西药体外试验具有很好的反转MDR效果，如环孢霉素、维拉帕米等，但内涵毒性高、运用剂量大、价格昂贵等要素限制了该药物的推广应用。寻求更有用的MDR反转剂正成为临床研讨的热门方向，研讨中药逆药剂多以寻觅高效低毒药物为主。
2中药单体
2.1汉防己甲素
汉防己甲素是从防己科植物根中提取的双苄基异喹啉类生物碱，是一种钙通道阻滞剂，不只有抗肿瘤的活性，并且能够反转肿瘤细胞MDR。陈宝安等[9]的研讨显现，汉防己甲素联合柔红霉素能够上调K562/A02细胞P21蛋白的表达，估测汉防己甲素经过操控细胞内钙离子浓度，影响PKC活性，然后上调细胞周期按捺蛋白P21表达。随后研讨显现，汉防己甲素能够使K562/A02细胞P-gp、MDR1表达下降，考虑可能是经过汉防己甲素添加了耐药肿瘤细胞P-gp磷酸化程度，削减耐药肿瘤细胞将化疗药物泵出细胞外，添加耐药肿瘤细胞对化疗药物灵敏性。以上研讨证明，汉防己甲素可反转白血病细胞MDR，反转耐药可能与其上调P21蛋白的表达、下调MDR1及P-gp的表达有关。endprint
2.2槲皮素
槲皮素存在于许多植物的花、叶、果实中，如芦丁（芸香苷），槲皮苷等，经酸水解可得到槲皮素，其是一个COX2发动子依靠的转录按捺剂。何海兰等[10]的研讨显现，槲皮素显着下调阿霉素对HL-60的COX2和MDR1 mRNA共表达，提示槲皮素在转录水平按捺COX2表达，反转HL-60细胞MDR。韩艳秋等[11]的研讨显现，槲皮素显着进步K562和K562/A细胞对阿霉素的灵敏性，但对K562/A细胞的增敏效果更强。一起，槲皮素可下调Bcl-2 基因宗族凋亡按捺基因Bcl-2（3.16倍），上调促凋亡基因BIM（3.23倍）、BIK（2.1倍），下调IAP宗族中BIRC3基因（3.6倍），下调TNF受体超宗族中TNF RSF10A（6.03倍）、TNF RSF1A（2.54倍）、TNF RSF9（2.31倍），上调DNA损害相关基因GADD45A（2.02倍），提示槲皮素可添加耐药白血病细胞对化疗药物灵敏性，可下调ABC转运蛋白表达，调理Bcl-2、TNF、IAP宗族等凋亡相关因子的表达，发挥反转肿瘤细胞的MDR活性。
2.3三氧化二砷
三氧化二砷（As2O3）是砒霜的首要成分，有研讨显现，其能进步HL60/ADR细胞吸取阿霉素的水平，下降HL60/ADR细胞MRP1表达率，促进HL60/ADR细胞凋亡，细胞前期凋亡率、晚期凋亡率均高于空白对照组，可使HL60/ADR细胞NF-κB、P65、48h IκB-α、抗凋亡蛋白Bcl-2表达显着减低，促凋亡蛋白Bax和Caspases活化所造成的的开裂的Caspase-3、Caspase-9、PARP蛋白表达显着升高[12]，提示As2O3可经过按捺耐药白血病细胞MRP1的表达，直接按捺NF-κB活化，下降Bcl-2/Bax份额，激活Caspase，发动凋亡通路，到达反转耐药的效果。
2.4苦参碱
苦参碱是从豆科植物苦参提取的一种生物碱，能够按捺白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡[13]。桂琳等[14]的研讨显现，苦参碱、塞来昔布独自及联合应用于K562/AO2细胞后，凋亡率显着添加，MDR1、COX2 mRNA及P-gp、COX2蛋白表达显着下调，提示苦参碱有反转K562/AO2细胞MDR的效果，其机制与下调MDR1、P-gp、COX2蛋白的表达有关。
2.5姜黄素
姜黄素是从姜科植物姜黄的根茎中提取的一种多酚类物质。黄燕芬等[15]选用化学办法盐酸水解得到姜黄素水解物与各化疗药物联用，成果显现K562、K562/AO2細胞对化疗药物的IC50显着下降，而免疫安排化学法检测姜黄素水解物处理后K562/AO2细胞P-gp表达下降，流式细胞仪检测参加姜黄素水解物细胞内柔红霉素荧光的强度显着比独自运用柔红霉素强，提示姜黄素水解物可经过按捺耐药肿瘤细胞外排泵蛋白P-gp排出，添加细胞内化疗药物浓度而反转白血病细胞MDR。
2.6川芎嗪
川芎嗪是从伞形科川芎根茎中提取别离的生物碱单体，是一种钙通道阻滞剂。王婷等[16]以为川芎嗪联合As2O3可反转K562/ADM细胞MDR，反转倍数为4.11，比独自运用川芎嗪、As2O3反转倍数均高（分别为1.02、1.16），提示川芎嗪与As2O3联用有协同反转K562/ADM细胞MDR的效果。进一步研讨显现，川芎嗪、As2O3两药联用使P-gp、GST-π表达下降，因而能够为川芎嗪、As2O3及联用均可反转K562/ADM细胞MDR，反转MDR机制与下调P-gp有关，还可能与GST-π表达有关。
2.7其他
有研讨显现，从五味子果实中别离的木脂素五味子甲素可反转肿瘤细胞MDR，可能机制与下调P-gp、MDR1表达及谷胱甘肽的数量有关[17]。黄连、黄柏等中药的重要成分小檗碱可经过下降P-gp表达，诱导多柔表星对K562/DOX细胞凋亡而反转K562/DOX的MDR效果[18]。有研讨显现，中药有用成分和厚朴酚、吴茱萸碱、人参皂苷等均有对肿瘤细胞MDR反转效果。
3中药复方
3.1复方正人汤
中药复方正人汤（FFJZ）由党参、白术、茯苓、黄芪、川芎等组成，有益气滋阴、利水、活血之效。廖斌[19]经过与环孢霉素A、维拉帕米比较，研讨中药FFJZ对K562/VCR细胞耐药性的反转效果，成果显现FFJZ可显着反转K562/VCR耐药细胞对VCR的抗药性，反转指数为3.58，且与环孢霉素A（反转指数为4.19）和维拉帕米（反转指数为4.23）类似，提示FFJZ具有较好的反转效果。随后研讨发现，经FFJZ处理后，FFJZ对白血病K562/VCR细胞耐药性有显着的反转效果，并能进步K562/VCR细胞对阿霉素的灵敏性。
3.2解毒化瘀方
解毒化瘀方由青黛、山慈菇、蚤休、虎杖、莪术、川芎、丹参、补骨脂配伍而成，具有清热解毒、活血通络之效。马武开等[20]的研讨显现，解毒化瘀中药含药血清能够下调白血病K562/AO2、HL60/Adr细胞P-gp、Bcl-2表达，但对P53基因表达无影响，因而估测解毒化瘀药能够下降耐药基因P-gp和下调抗凋亡因子Bcl-2的表达而反转白血病K562/AO2细胞MDR。更有研讨显现，解毒化瘀药能够下降K562/AO2细胞NF-κB信号基因的表达反转耐药，进步难治性白血病的临床效果[21]。
3.3益气养阴解毒方
益气养阴解毒方有人参、黄芪、甘草、当归、仙灵脾、麦冬、五味子、青黛、浙贝、千里光等药物，具有益气养阴、解毒散结效果。严鲁萍等[22]经过建立人红白血病K562/AO2裸鼠移植瘤模型，以维拉帕米为阴性对照，讨论益气养阴解毒方对K562/AO2细胞耐药性的效果，成果显现，益气养阴解毒方能够进步细胞内多柔比星的浓度。此外，益气养阴解毒方效果于耐药株移植瘤后并不影响P-gp表达，但可引起细胞增殖按捺呈现细胞凋亡，能下调Bcl-2的表达，提示益气养阴解毒方经过下调抗凋亡基因Bcl-2的表达，促进耐药细胞凋亡，发挥反转MDR的效果。endprint
3.4复方浙贝颗粒
复方浙贝颗粒由浙贝母、川芎、汉防己组成，首要有化痰散结、活血化瘀效果。有研讨显现，复方浙贝颗粒含药血清可添加K562/AO2细胞内的药物浓度，诱导细胞凋亡、下调Bcl-2蛋白表达、添加Bax蛋白表达，提示复方浙贝颗粒经过下降Bcl-2/Bax比值而增强MDR白血病细胞对化疗药物的灵敏性，然后完成其反转K562/AO2细胞耐药的效果[23]。
3.5六神丸
六神丸由牛黄、麝香、蟾酥、雄黄、珍珠、龙脑组成，有清热解毒、化瘀止痛的成效。史哲新等[24-25]的研讨显现，阿霉素效果于K562/DOX细胞的按捺率没有发生显着变化，而蟾酥与六神丸应用后细胞的按捺率显着升高。RT-PCR和Western blot成果显现，阿霉素、蟾酥效果于K562/DOX细胞时，与对照组比较MDR1表达未见显着差异；而六神丸含药血清效果后与阿霉素、蟾酥组比较MDR1表达显着下降，提示六神丸可能经过影响MDR1表达而按捺细胞增殖到达反转MDR效果。
4展望
现在，化学药物是医治白血病的首要方法，而白血病细胞MDR是医治失利的重要原因。肿瘤细胞MDR机制是多靶点、多途径的杂乱进程，化学药物在反转肿瘤细胞MDR存在效果靶点单一、毒性大的缺乏，中药因具有多途径、低毒等长处，能够反转白血病细胞MDR，这为寻求高效的反转剂供给了另一途径。中药作为反转剂，首要经过按捺ABC转运蛋白过度表达，如下调MDR1、P-gp、BCRP、MRP表达，下调TOPOⅡ，誘导细胞凋亡，上调促凋亡因子Bcl-2，下调抗凋亡因子IAP等多途径、多靶点反转MDR。但中药成分杂乱、药理效果尚不很清晰，对反转白血病细胞MDR效果机制、信号通路还需进一步深入研讨。
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（收稿日期：2017-06-05 本文修改：祁海文）endprint
