杨敏+梁胜翔+李宝贞+石宇红+许佳++++++莫汉有
[摘要] 意图 评论原发性枯燥综合征（pSS）并发非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者唇腺安排BCL-6基因重排的临床病理含义。 办法 将研讨目标分为pSS并发NHL组（16例），pSS未并发NHL组（20例），NHL未并发pSS组（阳性对照组，20例），健康人群组（阴性对照组，20例），选用荧光原位杂交技能检测4组研讨目标唇腺安排BCL-6基因的重排状况。 成果 pSS并发NHL组的BCL-6基因重排发作率为56.2%（9/16），pSS未并发NHL组的BCL-6基因重排发作率为20.0%（4/20），NHL未并发pSS组的BCL-6基因重排发作率为50.0%（10/20），正常人群组的BCL-6基因重排发作率为5.0%（1/20）。4组BCL-6基因重排发作率比较差异有计算学含义（χ2=84.225，P=0.000）。pSS并发NHL组与NHL未并发pSS组BCL-6基因重排发作率比较差异无计算学含义（χ2=2.251，P=0.139）。pSS并发NHL组BCL-6基因重排发作率明显高于pSS未并发NHL组（χ2=78.658，P=0.000）及健康人群组（χ2=88.391，P=0.000）。 定论 BCL-6基因重排与pSS并发NHL相关，BCL-6基因重排可作为猜测pSS并发NHL的生物学参阅目标。
[关键词] 原发性枯燥综合征；非霍奇金淋巴瘤；BCL-6基因；基因重排；荧光原位杂交
[中图分类号] R593 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）12（a）-0047-03
原发性枯燥综合征（primary Sjgren syndrome，pSS）是一种由淋巴细胞介导的首要累及外分泌腺的全身性本身免疫病。近年研讨发现，pSS与肿瘤关系密切，特别非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）多见，文献报导其发作淋巴瘤概率较常人高出44倍，以弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse-large B-cell lymphoma，DLBCL）为主[1]。pSS并发NHL的发病机制现在仍不清楚，相关研讨[2-4]标明，BCL-6基因重排是DLBCL发作中一个首要转化事情。现在，关于pSS并发NHL中BCL-6基因重排的研讨未见报导。本研讨拟用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技能在pSS兼并NHL患者唇腺安排中行BCL-6基因重排检测，评论BCL-6基因重排的临床病理含义，以期发现pSS兼并淋巴瘤的生物学猜测目标，为量化pSS患者恶变潜能并采纳前期干涉医治供给理论依据。
1 材料与办法
1.1 一般材料
选取2010年6月～2012年6月76例在本院住院患者作为研讨目标，将其分为4组，A组（pSS并发NHL患者），来自风湿免疫科及肿瘤科，16例，其间男性4例，女人12例，年纪18～69岁，均匀（52.7±5.9）岁；B组（pSS未并发NHL患者），来自风湿免疫科，20例，其间男性5例，女人15例，年纪18～70岁，均匀（53.5±5.4）岁；C组（NHL未并发pSS患者），来自肿瘤科，20例，其间男性6例，女人14例，年纪18～71岁，均匀（51.3±6.9）岁；D组（下唇外伤的健康人群），来自急诊科，20例，其间男性5例，女人15例，年纪18～71岁，均匀（53.3±6.1）岁。一切研讨目标的唇腺活检标本均由病理科制造，4组患者的年纪、性别比较差异均无计算学含义（P>0.05），具有可比性。
1.2 归入规范
①pSS患者确诊契合2002年pSS世界确诊分类规范[5]；②年纪18～71岁，性别不限，分组时遵循性别与年纪相匹配准则，病例材料完整；③挑选的pSS患者，术前均未承受激素及免疫抑制剂医治，一切病例均请口腔科取唇腺活检标本，并经病理科确诊契合pSS患者唇腺病理规范；④一切确诊NHL患者术前均未做放疗或化疗，均由两位高年资经验丰富的病理医师进行安排形态学和免疫安排化学剖析，安排类型的断定依照2001年版WHO淋巴瘤分类规范[6]；⑤医院道德委员会赞同；⑥知情赞同。
1.3 扫除规范
①继发要素所造成的pSS；②应扫除以下疾病：类肉瘤病，发病早于pSS的淋巴瘤、艾滋病、乙型或丙型肝炎、原发性纤维肌痛以及其他已知可引起自主神经元病变、枯燥性角膜炎或唾液腺肿大的疾病；③未经过医院道德委员会赞同。
1.4 FISH办法
BCL-6基因双色探针（32-191016）购自Vysis公司，操作进程拜见文献[7]。成果剖析：未发作BCL-6基因重排的细胞显现有两个橘红色和绿色的交融信号，代表一对BCL-6等位基因；发作BCL-6基因重排的细胞则显现有一个橘红色和绿色的交融信号，别的有一个绿色和一个橘红色别离的信号。
1.5 计算学办法
选用SPSS 13.0计算软件对数据进行处理，计数材料选用χ2查验，以P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
4组BCL-6基因重排发作率比较差异有计算学含义（χ2=84.225，P=0.000）；A组BCL-6基因重排发作率明显高于B组（χ2=78.658，P=0.000）和D组（χ2=88.391，P=0.000）；A组与C组BCL-6基因重排发作率比较差异无计算学含义（χ2=2.251，P=0.139）（表1）。
3 评论
pSS简单并发淋巴瘤是本病的特色之一，发作淋巴瘤患者以DLBCL最常见，约占成人NHL的30%～59%[8]。本课题组前期对628例pSS患者进行了长达12年的随访研讨，其间有16例患者并发NHL，发作率为2.55%[9]，而国外文献报导pSS患者并发NHL的发作率为7.5%[10]。现在，为何部分pSS患者病程极长而没有展开至淋巴瘤，而部分pSS患者却极快展开为淋巴瘤一向困扰着临床医师。
已有研讨标明，NHL的发作是因为单个细胞中发作多基因病变的进行性累积而成，最常见的基因改动类型是染色体易位，可见于>90%的NHL中，染色体易位导致一些癌基因发作重排，在NHL的发病机制上可能起重要作用[11]。Hans等[12]在进行淋巴瘤分子分类的研讨时发现，坐落人类染色体的3q27的BCL-6基因反常与DLBCL发作及预后关系密切。Tibiletti等[13]的研讨亦发现，BCL-6基因开裂重排是NHL最常见、特征性的染色体改动，首要存在于B细胞性NHL中的DLBCL和滤泡性淋巴瘤（FL）中，其重排的发作率别离占30%～40%和6%～14%，由此可见，BCL-6是与NHL特别是与DLBCL和FL关系密切的基因。
本研讨使用FISH技能对4组研讨目标唇腺安排BCL-6基因的重排状况进行检测，成果发现，16例pSS兼并NHL患者唇腺安排BCL-6基因重排发作率为56.2%（9/16），明显高于pSS未并发NHL（20.0%）及健康人群（5.0%），差异有计算学含义。在NHL未并发pSS组中BCL-6基因重排的发作率为50.0%（10/20），与pSS兼并NHL组患者比较差异无计算学含义，这提示BCL-6基因重排与pSS并发NHL高度相关。国内同类研讨标明，约60%的DLBCL病例有BCL-6基因重排，且其间的大多数均可见BCL-6蛋白过表达，提示BCL-6基因重排导致的BCL-6蛋白表达上调参加了部分DLBCL的发病进程[14]。研讨发现，BCL-6蛋白在pSS兼并NHL患者中的阳性率高达81.8%，明显高于健康对照组和pSS患者[15]，与本研讨成果相符。
总归，研讨BCL-6基因的反常对NHL发作展开分子机制的知道、临床预后的判别以及医治的监控等都具有重要的价值。BCL-6基因重排与pSS患者并发NHL密切相关，BCL-6基因重排可作为猜测pSS并发NHL的生物学参阅目标之一。因为本研讨仅是对pSS并发NHL患者唇腺安排BCL-6基因的重排进行单中心的开始评论，病例样本量少，需要展开多中心、大样本、前瞻性临床研讨来进一步验证。
[参阅文献]
[1] Ekstrm Smedby K，Vajdic CM，Falster M，et al.Autoimmune disorders and risk of non-Hodgkin lymphoma subtypes：a pooled analysis within the InterLymph Consortium[J].Blood，2008，111（8）：4029-4038.
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[5] 赵岩，贾宁，魏丽，等.原发性枯燥综合症2002年世界分类（确诊）规范的临床验证[J].中华风湿病学杂志，2003，7（9）：537.
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[7] 王桂秋，文亦磊，王华，等.荧光原位杂交技能在淋巴瘤确诊中的使用[J].广西医科大学学报，2008，25（6）：939-940.
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[9] 杨敏，莫汉有，李宝贞，等.原发性枯燥综合征兼并非霍奇金淋巴瘤16例临床特征剖析[J].重庆医学，2012，41（30）：3149-3151.
[10] Baimpa E，Dahabreh IJ，Voulgarelis M，et al.Hematologic manifestations and predictors of lymphoma development in primary Sjgren′s syndrome：clinical and pathophysiologic aspects[J].Medicine，2009，88（5）：284-293.
[11] Lossos IS，Morgensztem D.Prognostic biomarkers in diffuse large B-cell lymphoma[J].J Clin Oncol，2006，24（6）：995-1007.
[12] Hans CP，Weisenburger DD，Greiner TC，et al.Confirmation of the molecular classification of diffuse large B-cell lymphoma by immunohistochemistry using a tissue microarray[J].Blood，2004，103（1）：275-282.
[13] Tibiletti MG，Martin V，Bernasconi B，et al.BCL2，BCL6，MYC，MALT1，and BCL10 rearrangements in nodal diffuse large B-cell lymphomas：a multicenter evaluation of a new set of fluorescent in situ hybridization probes and correlation with clinical outcome[J].Hum Pathol，2009，40（5）：645-652.
[14] 徐方平，刘艳辉，骆新兰，等.弥漫性大B细胞淋巴瘤各分子亚型中的bcl-6基因重排与蛋白表达的临床含义[J].中华病理学杂志，2008，37（6）：371-376.
[15] 莫汉有，周润华，王晓桃，等.枯燥综合征患者唇腺p53、bcl-6及PCNA表达与其发作非霍奇金淋巴瘤的相关性研讨[J].重庆医学，2006，35（21）：1954-1956.
（收稿日期：2014-10-30 本文修改：李亚聪）
已有研讨标明，NHL的发作是因为单个细胞中发作多基因病变的进行性累积而成，最常见的基因改动类型是染色体易位，可见于>90%的NHL中，染色体易位导致一些癌基因发作重排，在NHL的发病机制上可能起重要作用[11]。Hans等[12]在进行淋巴瘤分子分类的研讨时发现，坐落人类染色体的3q27的BCL-6基因反常与DLBCL发作及预后关系密切。Tibiletti等[13]的研讨亦发现，BCL-6基因开裂重排是NHL最常见、特征性的染色体改动，首要存在于B细胞性NHL中的DLBCL和滤泡性淋巴瘤（FL）中，其重排的发作率别离占30%～40%和6%～14%，由此可见，BCL-6是与NHL特别是与DLBCL和FL关系密切的基因。
本研讨使用FISH技能对4组研讨目标唇腺安排BCL-6基因的重排状况进行检测，成果发现，16例pSS兼并NHL患者唇腺安排BCL-6基因重排发作率为56.2%（9/16），明显高于pSS未并发NHL（20.0%）及健康人群（5.0%），差异有计算学含义。在NHL未并发pSS组中BCL-6基因重排的发作率为50.0%（10/20），与pSS兼并NHL组患者比较差异无计算学含义，这提示BCL-6基因重排与pSS并发NHL高度相关。国内同类研讨标明，约60%的DLBCL病例有BCL-6基因重排，且其间的大多数均可见BCL-6蛋白过表达，提示BCL-6基因重排导致的BCL-6蛋白表达上调参加了部分DLBCL的发病进程[14]。研讨发现，BCL-6蛋白在pSS兼并NHL患者中的阳性率高达81.8%，明显高于健康对照组和pSS患者[15]，与本研讨成果相符。
总归，研讨BCL-6基因的反常对NHL发作展开分子机制的知道、临床预后的判别以及医治的监控等都具有重要的价值。BCL-6基因重排与pSS患者并发NHL密切相关，BCL-6基因重排可作为猜测pSS并发NHL的生物学参阅目标之一。因为本研讨仅是对pSS并发NHL患者唇腺安排BCL-6基因的重排进行单中心的开始评论，病例样本量少，需要展开多中心、大样本、前瞻性临床研讨来进一步验证。
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（收稿日期：2014-10-30 本文修改：李亚聪）
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本研讨使用FISH技能对4组研讨目标唇腺安排BCL-6基因的重排状况进行检测，成果发现，16例pSS兼并NHL患者唇腺安排BCL-6基因重排发作率为56.2%（9/16），明显高于pSS未并发NHL（20.0%）及健康人群（5.0%），差异有计算学含义。在NHL未并发pSS组中BCL-6基因重排的发作率为50.0%（10/20），与pSS兼并NHL组患者比较差异无计算学含义，这提示BCL-6基因重排与pSS并发NHL高度相关。国内同类研讨标明，约60%的DLBCL病例有BCL-6基因重排，且其间的大多数均可见BCL-6蛋白过表达，提示BCL-6基因重排导致的BCL-6蛋白表达上调参加了部分DLBCL的发病进程[14]。研讨发现，BCL-6蛋白在pSS兼并NHL患者中的阳性率高达81.8%，明显高于健康对照组和pSS患者[15]，与本研讨成果相符。
总归，研讨BCL-6基因的反常对NHL发作展开分子机制的知道、临床预后的判别以及医治的监控等都具有重要的价值。BCL-6基因重排与pSS患者并发NHL密切相关，BCL-6基因重排可作为猜测pSS并发NHL的生物学参阅目标之一。因为本研讨仅是对pSS并发NHL患者唇腺安排BCL-6基因的重排进行单中心的开始评论，病例样本量少，需要展开多中心、大样本、前瞻性临床研讨来进一步验证。
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（收稿日期：2014-10-30 本文修改：李亚聪）
