姬涛 李怀平 王朔
[摘要] 意图 优选红龙镇痛片的最佳提取工艺。 办法 选用正交试验法L9（34）别离以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作为调查目标，优选红龙镇痛片制备过程中的提取工艺。 成果 终究断定最佳醇提取工艺为每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 定论 该制备工艺安稳、合理、可行。
[关键词] 红龙镇痛片；正交试验法；醇提取
[中图分类号] R94 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03
红龙镇痛片为藏医古验方，由龙骨、印度獐牙菜、红花等十五味药组成，具有醒脑开窍、通络止痛的成效，原方收载于云丹嘉措的《藏医临床札记》，一百多年的临床使用证明，其对偏头痛、血管性头痛效果杰出。对该药品原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，有效成分隔释缓慢，一起由于原药材细粉入药，也影响到卫生学不合格的问题。本试验依据配方中药材所含化学成分的理化性质，选用不同的溶剂进行分隔提取，确保药材中的药效成分能够被充沛的提取出来。本研讨将红龙镇痛片制剂前工艺分为以下3个部分。①醇提部分：印度獐牙菜、红花、金腰草、川西小黄菊、马尿泡、波棱瓜子6味药；②水提部分：铁棒锤、唐古特乌头、珍珠母、龙骨、泉华、石花、短穗兔耳草7味药；③破坏部分：安息香、熊胆粉2味药。本研讨侧重对醇提两部分进行了工艺研讨，选用正交试验，优选了最佳提取工艺。
1 资料与办法
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪器 KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高效液相色谱仪：日立L-2100泵，日立L-2400检测器；岛津AUW220D电子天平；HH-4数显恒温水浴锅（常州荣冠试验剖析仪器厂）。
1.1.2 试药 药材由青海金珂藏药股份有限公司供给；獐牙菜苦苷对照品（0785-200303）由中国食品药品检定研讨院供给；水为纯化水，甲醇为色谱纯，其他试剂均为剖析纯。
1.2 办法
本品原规范中以獐牙菜苦苷含量为含量测定项，因而本试验以獐牙菜苦苷提取率作为目标之一，进行了醇提工艺的调查。
1.2.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）为活动相；检测波长235 nm；进样量5 μl；流速1 ml/min，柱温室温[1]。
1.2.2 对照品溶液的制备 取獐牙菜苦苷对照品适量，精细称定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，摇匀，即得。
1.2.3 药材溶液的制备 取印度獐牙菜药材细粉约0.5 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.4 供试品溶液的制备 取试验制得样品细粉约1.0 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.5 醇浓度挑选 取印度獐牙菜20.1 g、红花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黄菊20.1 g、马尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味药材混合合计72.6 g，共取4份，别离参加8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，滤过，滤液浓缩枯燥，研细，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
1.2.6 正交试验 为进一步优选醇提最佳工艺，选定加醇量、提取时刻和提取次数作为调查的三个要素，各取三个水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率为目标归纳评分。正交试验规划见表1。
试验室中的提取时刻是由提取次数断定，提取时刻由前往后顺次进行。
称取印度獐牙菜等6味药材混合合计72.6 g，共取9份，按正交表次第进行工艺试验，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
2 成果
2.1 不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较
不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较详细成果见表2。成果表明，醇浓度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差异较小，为确保药物中有效成分能最大极限的提取出来，一起也能够节省生产成本，断定选用浓度为75%乙醇进行提取。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
2.2 醇提正交试验
醇提正交试验直观剖析详细见表3，醇提正交试验方差剖析详细见表4。由方差剖析成果看，三个要素对提取效果影响的效果次第为C>A>B，其间C要素对成果有显著性影响，即提取次数影响最大，加醇量次之，提取时刻影响最小，再结合直观剖析成果，断定醇提的最佳工艺参数为A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。
2.3 验证试验
按配方配比称取醇提药材合计363 g，共取3份，选用正交试验优选得到的条件进行醇提，测定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，成果与正交试验根本共同，阐明提取工艺条件安稳可行（表5）。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
3 评论
方中金腰草、川西小黄菊中含黄酮类等有效成分[2-3]，马尿泡中含有生物碱类等成分[4]，波棱瓜子中含有木质素及油脂类成分等[5]，这些成分在醇中都有很好的溶解度，一起也有报导，印度獐牙菜[6]、红花[7]醇提效果也较好，因而本文将上述六味药兼并进行醇提取，优选最佳提取计划。
本试验参阅原规范以獐牙菜苦苷含量为主要目标，一起以干膏得率为非必须目标，两者结合，归纳点评，能够比较客观地反映各个要素及要素水平对提取工艺的影响。
本试验以最大程度提取药材中有效成分为准则，经过体系的研讨得到最佳工艺为药材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，验证成果表明此工艺安稳可行，适用于工业生产。
对本方原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，而传统藏药中许多成药都以药材粉末直接入药，存在生产方式粗豪、质量较难操控等缺陷[8]，因而，怎样将现代技能引进藏药的二次开发中，成为现在限制藏药开展的一个要素。经过本试验的研讨，期望能为其他藏药种类的研制供给学习。
[参阅文献]
[1] 国家药品监督管理局.国家中成药规范汇编经络肢体脑系分册[M].北京：公民卫生出版社，2002：71.
[2] 王玉平，杨云裳，杨林西，等.藏药金腰草中黄酮诱导K562细胞凋亡及其分子机制研讨[J].有用癌症杂志，2005， 20（4）：374-376.
[3] 杨爱梅，鲁光滑，师彦平.藏药川西小黄菊化学成分的研讨[J].中药材，2007，30（5）：546-548
[4] 朱华勇，吴娟，黄帅，等.马尿泡化学成分的研讨[J].华西药学杂志，2011，26（4）：305-307
[5] 徐冰.藏药波棱瓜子化学成分研讨[D].重庆：西南大学，2012.
[6] 黄一平，毕丽丽，陈超，等.藏药印度獐牙菜提取工艺研讨[J].中成药，2008，30（2）：190-192.
[7] 李璘，陆茵，马骋，等.红花醇提物对心肌缺血犬的血活动力的效果[J].中药药理与临床，2002，（6）：24-26.
[8] 曹越，孟宪纪. 藏药及其研讨现状[J].甘肃中医，2004，17（10）：32-33.
（收稿日期：2013-10-15 本文修改：林利利）
[摘要] 意图 优选红龙镇痛片的最佳提取工艺。 办法 选用正交试验法L9（34）别离以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作为调查目标，优选红龙镇痛片制备过程中的提取工艺。 成果 终究断定最佳醇提取工艺为每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 定论 该制备工艺安稳、合理、可行。
[关键词] 红龙镇痛片；正交试验法；醇提取
[中图分类号] R94 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03
红龙镇痛片为藏医古验方，由龙骨、印度獐牙菜、红花等十五味药组成，具有醒脑开窍、通络止痛的成效，原方收载于云丹嘉措的《藏医临床札记》，一百多年的临床使用证明，其对偏头痛、血管性头痛效果杰出。对该药品原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，有效成分隔释缓慢，一起由于原药材细粉入药，也影响到卫生学不合格的问题。本试验依据配方中药材所含化学成分的理化性质，选用不同的溶剂进行分隔提取，确保药材中的药效成分能够被充沛的提取出来。本研讨将红龙镇痛片制剂前工艺分为以下3个部分。①醇提部分：印度獐牙菜、红花、金腰草、川西小黄菊、马尿泡、波棱瓜子6味药；②水提部分：铁棒锤、唐古特乌头、珍珠母、龙骨、泉华、石花、短穗兔耳草7味药；③破坏部分：安息香、熊胆粉2味药。本研讨侧重对醇提两部分进行了工艺研讨，选用正交试验，优选了最佳提取工艺。
1 资料与办法
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪器 KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高效液相色谱仪：日立L-2100泵，日立L-2400检测器；岛津AUW220D电子天平；HH-4数显恒温水浴锅（常州荣冠试验剖析仪器厂）。
1.1.2 试药 药材由青海金珂藏药股份有限公司供给；獐牙菜苦苷对照品（0785-200303）由中国食品药品检定研讨院供给；水为纯化水，甲醇为色谱纯，其他试剂均为剖析纯。
1.2 办法
本品原规范中以獐牙菜苦苷含量为含量测定项，因而本试验以獐牙菜苦苷提取率作为目标之一，进行了醇提工艺的调查。
1.2.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）为活动相；检测波长235 nm；进样量5 μl；流速1 ml/min，柱温室温[1]。
1.2.2 对照品溶液的制备 取獐牙菜苦苷对照品适量，精细称定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，摇匀，即得。
1.2.3 药材溶液的制备 取印度獐牙菜药材细粉约0.5 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.4 供试品溶液的制备 取试验制得样品细粉约1.0 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.5 醇浓度挑选 取印度獐牙菜20.1 g、红花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黄菊20.1 g、马尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味药材混合合计72.6 g，共取4份，别离参加8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，滤过，滤液浓缩枯燥，研细，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
1.2.6 正交试验 为进一步优选醇提最佳工艺，选定加醇量、提取时刻和提取次数作为调查的三个要素，各取三个水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率为目标归纳评分。正交试验规划见表1。
试验室中的提取时刻是由提取次数断定，提取时刻由前往后顺次进行。
称取印度獐牙菜等6味药材混合合计72.6 g，共取9份，按正交表次第进行工艺试验，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
2 成果
2.1 不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较
不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较详细成果见表2。成果表明，醇浓度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差异较小，为确保药物中有效成分能最大极限的提取出来，一起也能够节省生产成本，断定选用浓度为75%乙醇进行提取。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
2.2 醇提正交试验
醇提正交试验直观剖析详细见表3，醇提正交试验方差剖析详细见表4。由方差剖析成果看，三个要素对提取效果影响的效果次第为C>A>B，其间C要素对成果有显著性影响，即提取次数影响最大，加醇量次之，提取时刻影响最小，再结合直观剖析成果，断定醇提的最佳工艺参数为A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。
2.3 验证试验
按配方配比称取醇提药材合计363 g，共取3份，选用正交试验优选得到的条件进行醇提，测定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，成果与正交试验根本共同，阐明提取工艺条件安稳可行（表5）。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
3 评论
方中金腰草、川西小黄菊中含黄酮类等有效成分[2-3]，马尿泡中含有生物碱类等成分[4]，波棱瓜子中含有木质素及油脂类成分等[5]，这些成分在醇中都有很好的溶解度，一起也有报导，印度獐牙菜[6]、红花[7]醇提效果也较好，因而本文将上述六味药兼并进行醇提取，优选最佳提取计划。
本试验参阅原规范以獐牙菜苦苷含量为主要目标，一起以干膏得率为非必须目标，两者结合，归纳点评，能够比较客观地反映各个要素及要素水平对提取工艺的影响。
本试验以最大程度提取药材中有效成分为准则，经过体系的研讨得到最佳工艺为药材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，验证成果表明此工艺安稳可行，适用于工业生产。
对本方原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，而传统藏药中许多成药都以药材粉末直接入药，存在生产方式粗豪、质量较难操控等缺陷[8]，因而，怎样将现代技能引进藏药的二次开发中，成为现在限制藏药开展的一个要素。经过本试验的研讨，期望能为其他藏药种类的研制供给学习。
[参阅文献]
[1] 国家药品监督管理局.国家中成药规范汇编经络肢体脑系分册[M].北京：公民卫生出版社，2002：71.
[2] 王玉平，杨云裳，杨林西，等.藏药金腰草中黄酮诱导K562细胞凋亡及其分子机制研讨[J].有用癌症杂志，2005， 20（4）：374-376.
[3] 杨爱梅，鲁光滑，师彦平.藏药川西小黄菊化学成分的研讨[J].中药材，2007，30（5）：546-548
[4] 朱华勇，吴娟，黄帅，等.马尿泡化学成分的研讨[J].华西药学杂志，2011，26（4）：305-307
[5] 徐冰.藏药波棱瓜子化学成分研讨[D].重庆：西南大学，2012.
[6] 黄一平，毕丽丽，陈超，等.藏药印度獐牙菜提取工艺研讨[J].中成药，2008，30（2）：190-192.
[7] 李璘，陆茵，马骋，等.红花醇提物对心肌缺血犬的血活动力的效果[J].中药药理与临床，2002，（6）：24-26.
[8] 曹越，孟宪纪. 藏药及其研讨现状[J].甘肃中医，2004，17（10）：32-33.
（收稿日期：2013-10-15 本文修改：林利利）
[摘要] 意图 优选红龙镇痛片的最佳提取工艺。 办法 选用正交试验法L9（34）别离以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作为调查目标，优选红龙镇痛片制备过程中的提取工艺。 成果 终究断定最佳醇提取工艺为每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 定论 该制备工艺安稳、合理、可行。
[关键词] 红龙镇痛片；正交试验法；醇提取
[中图分类号] R94 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03
红龙镇痛片为藏医古验方，由龙骨、印度獐牙菜、红花等十五味药组成，具有醒脑开窍、通络止痛的成效，原方收载于云丹嘉措的《藏医临床札记》，一百多年的临床使用证明，其对偏头痛、血管性头痛效果杰出。对该药品原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，有效成分隔释缓慢，一起由于原药材细粉入药，也影响到卫生学不合格的问题。本试验依据配方中药材所含化学成分的理化性质，选用不同的溶剂进行分隔提取，确保药材中的药效成分能够被充沛的提取出来。本研讨将红龙镇痛片制剂前工艺分为以下3个部分。①醇提部分：印度獐牙菜、红花、金腰草、川西小黄菊、马尿泡、波棱瓜子6味药；②水提部分：铁棒锤、唐古特乌头、珍珠母、龙骨、泉华、石花、短穗兔耳草7味药；③破坏部分：安息香、熊胆粉2味药。本研讨侧重对醇提两部分进行了工艺研讨，选用正交试验，优选了最佳提取工艺。
1 资料与办法
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪器 KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高效液相色谱仪：日立L-2100泵，日立L-2400检测器；岛津AUW220D电子天平；HH-4数显恒温水浴锅（常州荣冠试验剖析仪器厂）。
1.1.2 试药 药材由青海金珂藏药股份有限公司供给；獐牙菜苦苷对照品（0785-200303）由中国食品药品检定研讨院供给；水为纯化水，甲醇为色谱纯，其他试剂均为剖析纯。
1.2 办法
本品原规范中以獐牙菜苦苷含量为含量测定项，因而本试验以獐牙菜苦苷提取率作为目标之一，进行了醇提工艺的调查。
1.2.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）为活动相；检测波长235 nm；进样量5 μl；流速1 ml/min，柱温室温[1]。
1.2.2 对照品溶液的制备 取獐牙菜苦苷对照品适量，精细称定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，摇匀，即得。
1.2.3 药材溶液的制备 取印度獐牙菜药材细粉约0.5 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.4 供试品溶液的制备 取试验制得样品细粉约1.0 g，精细称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.2.5 醇浓度挑选 取印度獐牙菜20.1 g、红花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黄菊20.1 g、马尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味药材混合合计72.6 g，共取4份，别离参加8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，滤过，滤液浓缩枯燥，研细，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
1.2.6 正交试验 为进一步优选醇提最佳工艺，选定加醇量、提取时刻和提取次数作为调查的三个要素，各取三个水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率为目标归纳评分。正交试验规划见表1。
试验室中的提取时刻是由提取次数断定，提取时刻由前往后顺次进行。
称取印度獐牙菜等6味药材混合合计72.6 g，共取9份，按正交表次第进行工艺试验，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，核算提取率。
2 成果
2.1 不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较
不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较详细成果见表2。成果表明，醇浓度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差异较小，为确保药物中有效成分能最大极限的提取出来，一起也能够节省生产成本，断定选用浓度为75%乙醇进行提取。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
2.2 醇提正交试验
醇提正交试验直观剖析详细见表3，醇提正交试验方差剖析详细见表4。由方差剖析成果看，三个要素对提取效果影响的效果次第为C>A>B，其间C要素对成果有显著性影响，即提取次数影响最大，加醇量次之，提取时刻影响最小，再结合直观剖析成果，断定醇提的最佳工艺参数为A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。
2.3 验证试验
按配方配比称取醇提药材合计363 g，共取3份，选用正交试验优选得到的条件进行醇提，测定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，成果与正交试验根本共同，阐明提取工艺条件安稳可行（表5）。
印度獐牙菜药材中獐牙菜苦苷含量为0.70%
3 评论
方中金腰草、川西小黄菊中含黄酮类等有效成分[2-3]，马尿泡中含有生物碱类等成分[4]，波棱瓜子中含有木质素及油脂类成分等[5]，这些成分在醇中都有很好的溶解度，一起也有报导，印度獐牙菜[6]、红花[7]醇提效果也较好，因而本文将上述六味药兼并进行醇提取，优选最佳提取计划。
本试验参阅原规范以獐牙菜苦苷含量为主要目标，一起以干膏得率为非必须目标，两者结合，归纳点评，能够比较客观地反映各个要素及要素水平对提取工艺的影响。
本试验以最大程度提取药材中有效成分为准则，经过体系的研讨得到最佳工艺为药材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，验证成果表明此工艺安稳可行，适用于工业生产。
对本方原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接破坏入药，而传统藏药中许多成药都以药材粉末直接入药，存在生产方式粗豪、质量较难操控等缺陷[8]，因而，怎样将现代技能引进藏药的二次开发中，成为现在限制藏药开展的一个要素。经过本试验的研讨，期望能为其他藏药种类的研制供给学习。
[参阅文献]
[1] 国家药品监督管理局.国家中成药规范汇编经络肢体脑系分册[M].北京：公民卫生出版社，2002：71.
[2] 王玉平，杨云裳，杨林西，等.藏药金腰草中黄酮诱导K562细胞凋亡及其分子机制研讨[J].有用癌症杂志，2005， 20（4）：374-376.
[3] 杨爱梅，鲁光滑，师彦平.藏药川西小黄菊化学成分的研讨[J].中药材，2007，30（5）：546-548
[4] 朱华勇，吴娟，黄帅，等.马尿泡化学成分的研讨[J].华西药学杂志，2011，26（4）：305-307
[5] 徐冰.藏药波棱瓜子化学成分研讨[D].重庆：西南大学，2012.
[6] 黄一平，毕丽丽，陈超，等.藏药印度獐牙菜提取工艺研讨[J].中成药，2008，30（2）：190-192.
[7] 李璘，陆茵，马骋，等.红花醇提物对心肌缺血犬的血活动力的效果[J].中药药理与临床，2002，（6）：24-26.
[8] 曹越，孟宪纪. 藏药及其研讨现状[J].甘肃中医，2004，17（10）：32-33.
（收稿日期：2013-10-15 本文修改：林利利）
